Produk yang diperoleh melalui kitaran in vitro dan pengayaan RNase R memerlukan lebih jauh daripada transkripsi in vitro (IVT), termasuk substrat yang tidak digunakan dalam tindak balas kitaran, produk sampingan tindak balas dan RNA yang digertak.
Yaohai Bio-Pharma mempunyai pemendakan LiCl matang, penulenan manik magnetik, penulenan yang dibangunkan sendiri dan penyelesaian penulenan terpelbagai lain untuk membuang pelbagai kekotoran dengan berkesan dan menyediakan circRNA yang sangat tulen.
Penyelesaian penulenan untuk sejumlah kecil circRNA untuk pemindahan sel dan sebagai sebahagian daripada eksperimen haiwan.
Penyelesaian penulenan untuk sejumlah kecil circRNA untuk pemindahan sel dan sebagai sebahagian daripada eksperimen haiwan.
Senario aplikasi dengan kualiti yang lebih tinggi;
Proses penulenan yang stabil dan berskala untuk memenuhi keperluan pengeluaran GMP.
Proses | Perkhidmatan Pilihan | Butiran Perkhidmatan | Tempoh Penghantaran (Hari) | Deliverables |
pemurnian circRNA | Penyelesaian penulenan konvensional | Pemendakan litium klorida | 1 | bahan dadah circRNA |
Pembersihan manik magnetik | ||||
Pembersihan circRNA yang sangat tulen | Kromatografi cecair prestasi tinggi (HPLC) persediaan | 1-2 | ||
Pertukaran penimbal | Ultrafiltration | 1 | ||
kawalan kualiti circRNA | Konsentrasi / memurnikan | Spektrofotometri ultraungu (UV). | 0.5 | Laporan ujian |
Kesucian | Elektroforesis gel agarose (AGE)/E-gel | |||
HPLC-pilihan | 1 |
Senario aplikasi boleh dicapai.
circRNA dengan ketulenan lebih daripada 90%;
Melalui kawalan ketat RNases dalam persekitaran eksperimen dan bahan habis pakai, degradasi RNA dicegah dengan berkesan.
Yaohai Bio-Pharma telah mewujudkan penyelesaian penulenan circRNA matang yang boleh membuang pelbagai kekotoran berkaitan proses dengan berkesan.
Produk RNA pekeliling yang disucikan oleh penyelesaian konvensional masih jelas bercampur dengan RNA dan intron yang dicakar.
Selepas penyelesaian penulenan yang dibangunkan oleh Yaohai Bio-Pharma, pelbagai kekotoran RNA linear, seperti RNA berparut dan intron, boleh berjaya dikeluarkan.
Pengesahan Ungkapan circRNA
Menggunakan liposom konvensional, circRNA eGFP yang telah disucikan ditransfeksi ke dalam sel 293T, dan isyarat pendarfluor diperhatikan selepas 24 jam dan terus dipertingkatkan pada 48 jam. Isyarat pendarfluor masih boleh dikesan pada hari ke-7 dan hari ke-14 selepas pemindahan.