Plazmīda: maza apļveida DNS molekula ar lielu potenciālu

Plazmīdas, mazas apļveida DNS molekulas, kalpo kā būtiski vektori DNS rekombinācijai molekulārās bioloģijas pētījumos un gēnu terapijā. Plazmīdu iznākums un kvalitāte ir izšķiroša nozīme, jo superspirāles proporcija un endotoksīna saturs ir divi nozīmīgi faktori, kas ietekmē plazmīdu kvalitāti.

Plazmīdu apakštipi

Plazmīdas, kas ekstrahētas no Escherichia coli (E. coli), pastāv dažādos apakštipos: supercoiled (SC), atvērtās cirkulārās (OC) un lineārās (L) formās (1. attēls). Starp tiem superspirētām plazmīdām ir lieliska stabilitāte, antigenitāte un augsta transfekcijas un ekspresijas efektivitāte.

1. attēls. Kopējo plazmīdu apakštipu shematiskā diagramma

Plazmīdas DNS agarozes gēla elektroforēzē migrācijas ātruma secība ir superspirēta DNS, lineāra DNS un atvērta cirkulāra DNS (2. attēls).

2. attēls. Dažādu plazmīdu apakštipu agarozes gēla elektroforēzes migrācijas modelis

Uzņēmums Yaohai Bio-Pharma ir nepārtraukti uzlabojis savus procesus un metodes, lai nodrošinātu, ka transfekcijas pakāpes plazmīdu superspirētais īpatsvars ir ≥85% un pētnieciskās kvalitātes plazmīdu īpatsvars ir ≥50%. Tālāk ir parādīts gadījuma demonstrējums (3. attēls), kur agarozes gēla elektroforēze tiek apvienota ar Gel-Pro Analyzer programmatūru, lai noteiktu superspirāles proporciju.

3. attēls. Plazmīdas superspirālās proporcijas kvalitātes pārbaudes rezultāti

Endotoksīns

Endotoksīns, gramnegatīvo baktēriju šūnu sienas sastāvdaļa, galvenokārt sastāv no lipopolisaharīda A (LPS-A) kā tā toksiskās sastāvdaļas. Plazmīdas ekstrakcijas laikā endotoksīns izdalās līzes šķīdumā, nopietni ietekmējot plazmīdu transfekcijas efektivitāti šūnās. Turklāt tas var aktivizēt nespecifiskas imūnās atbildes šūnās, izraisot kļūdaini pozitīvus rezultātus eksperimentos.

Yaohai Bio-Pharma izmanto "neievadīšanas" un "augstas noņemšanas" pieeju, stingri kontrolējot endotoksīnu saturošu reaģentu un materiālu izmantošanu visā attīrīšanas procesā. Uzņēmums ir izstrādājis arī efektīvu endotoksīnu noņemšanas metodi, kas piedāvā trīs endotoksīnu satura līmeņus: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg un ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma ir augstas caurlaidības plazmīdu ekstrakcijas pakalpojumu līnija, kas spēj piegādāt 1 mg ekstrahētu plazmīdu pat vienas nedēļas laikā. Pēc noklusējuma tas nodrošina vairāk nekā septiņus kvalitātes kontroles (QC) testus, lai nodrošinātu augstas kvalitātes, augsta standarta plazmīdu piegādi no vairākiem aspektiem.

Mēs arī aktīvi meklējam institucionālus vai individuālus globālus partnerus. Mēs piedāvājam konkurētspējīgāko atalgojumu nozarē. Ja jums ir kādi jautājumi, lūdzu, sazinieties ar mums: [email protected]