mRNA נוצר על ידי תעתוע חלקי (IVT) מ-DNA פלזמי ליניארי (pDNA). גם תוצרי לוואי נוצרים במהלך התהליך של IVT, כולל RNA כפול-סילון (dsRNA) שזוהו כתמרונים עיקריים לנתיב החיסוני הקדום. זה קריטי להסיר את הטמאות ולקבל תוצאות גבוהות של mRNA טהור למחקר mRNA ותפקוד תרופתי in vitro/vivo.
Yaohai Bio-Pharma פיתחה סדרה של טכנולוגיות להרכבת mRNA כדי לספק mRNA בטהרה גבוהה , כמו תכנון ותיקון סדרות, IVT, טיהור, שימור יבש ועטיפה בננופריטים שומניים (LNP). כל המוצרים מוצאים תחת תקן איכות חמור. כרומטוגרפיה אפיניטי (AC), מבוססת על האינטראקציה החזקה והמבחרית בין זנב ה-polyA של mRNA עם הפאזה הסטציונרית oligo dT, היא אסטרטגיה יעילת ומממשת לטיהור mRNA.
תוצרי עבודה
מוצר |
MRNA טהור במידה מותאמת אישית |
אורך | 100~10,000 נוקלאוטידים |
תוכן RNA | 100 µg~10 mg (OD260) |
טוהר | A260/A280 |
זיהוי וטהרה |
אלקטרופורזה בגל אגרוז (AGE) אלקטרופורזה דרך קפילר (CE) |
מגן | מים חופשיי RNase (נוזל) |
מִשׁלוֹחַ | שליחה עם קרח יבש; או בטמפרטורה אמבינטית |
אחסון |
● נוזל, בטמפרטורה של או מתחת ל-20°C ● אבקה ליופייליזד, ב-4°C |
שימוש |
פיתוח תכשיר LNP, בדיקות תאיות, ניסוי בעלי חיים |
אפשרויות מותאמות אחרות
כובע 5' |
● בלעדיו כתר ● Cap0, כתר משולב ● Cap1, כתר משולב ● Cap1, כתר אנזימתי |
5' UTR/3' UTR |
● סדרת UTR טבעית ● סדרת UTR מוטנטית/מעוצבת |
זנב PolyA 3' |
● זנב A100 ~ A120 (מומלץ) ● זנב PolyA מפוצל ● זנב מותאם אחר |
נוקלאוזידים מודיפי |
● בסיסים לא מודיפיקטים, ● פסיאודוורidine (Ψ), ● N1-מetylפסיאודוורidine (N1Ψ), ● 5-מִתִּילסִיטוֹסִין (m5C), ● 5-מִתִּיליֻרִידִין (m5U), ● 5-מִתּוֹכְסִייֻרִידִין (5moU), ● 2-תִּיוּריֻדִין (s2U), ● 2′-O-מִתִּיל-U ● אחרים |
מחקר מקרה
הפתחנו תהליך טיהור כרומטוגרפי מרבי שלבים והכינו mRNA עם טהרה ושלמות גבוהות (>95%).
תמונה. ניתוח של mRNA עם טהרה גבוהה (>98%)