RNAs מעגלי (circRNA) הם מחלקה של RNA חד-גדילי, סגור קוולנטית ללא קצוות 5' או 3'. תכונה ייחודית זו יכולה למנוע פירוק circRNA על ידי exonucleases ולהעצים circRNA עם יציבות גבוהה ויעילות תרגום ביחס ל-mRNA ליניארי.
circRNA מסונתז על ידי מחזור במבחנה ממבשר RNA ליניארי. זיהומים הקשורים לתהליך או למוצר עלולים להוביל לתגובה חיסונית מולדת, במיוחד RNA ליניארי (מבשרי RNA, RNA מחורצים, אינטרונים שנכרתו). זה קריטי להסיר זיהומי RNA ליניאריים ולהשיג תשואות גבוהות של circRNA טהור עבור יישומים מחקריים וטיפוליים במבחנה / vivo.
Yaohai Bio-Pharma הקימה סט של טכנולוגיות סינתזת circRNA כדי לספק circRNA טהור במיוחד, הכוללות עיצוב ואופטימיזציה של רצפים, שעתוק חוץ גופית (IVT), מחזור/מחזור, כרומטוגרפיה נוזלית הכנה לטיהור בביצועים גבוהים (HPLC), וננו-חלקיקים שומנים ( LNP) אנקפסולציה. כל המוצרים משוחררים תחת תקני בקרת איכות מחמירים (QC).
תוצרים
המוצר | circRNA טהור במיוחד |
שיטת סינתזה | חבור עצמי של אינטררון קבוצה I |
תוכן RNA | 100 מיקרוגרם ~ 10 מ"ג (OD260) |
אורך | 50~8,000 נוקלאוטידים |
טוֹהַר | A260 / A280 |
זיהוי וטוהר | אגרוס ג'ל אלקטרופורזה (AGE), כרומטוגרפיה שומנים בביצועים גבוהים (HPLC) |
בלם | מים ללא RNase (נוזל) |
משלוח | ספינה עם קרח יבש; או תחת טמפרטורת הסביבה |
אחסון | נוזל, ב-20 מעלות צלזיוס או מתחת; אבקה ליאופילית, ב-4 מעלות צלזיוס |
בקשה | פיתוח ניסוח LNP, מבחני תאים, ניסוי בבעלי חיים |
מקרים לדוגמא
פיתחנו תהליך טיהור ניתן להרחבה בעיקר באמצעות HPLC הכנה, והכנו circRNA בטוהר גבוה (~95%).
איור. טיהור וניתוח של circRNA עם טוהר גבוה (98%)