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Prodotto da catalogo
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Sintesi di RNA personalizzata
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Servizio mRNA CDMO
Gli mRNA sono riconosciuti per la loro instabilità intrinseca e sono suscettibili alla frammentazione in presenza di fattori esterni, in particolare durante i processi di trascrizione in vitro (IVT) e purificazione, dove le nucleasi ubiquitarie rappresentano una sfida. La valutazione dell'integrità dell'mRNA è fondamentale nel successivo sviluppo di farmaci basati sull'mRNA, garantendo sia la sicurezza che la disponibilità del prodotto.
Yaohai-BioPharma fornisce servizi completi di test dell'integrità dell'mRNA, utilizzando metodi come l'elettroforesi su gel di agarosio (AGE), l'elettroforesi capillare (CEG) e la cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC), aderendo a rigorosi standard di qualità sia per la ricerca che per gli studi clinici.
Secondo le considerazioni normative dell'OMS, “l'integrità della struttura dell'mRNA è considerata un attributo di qualità critico per il rilascio dell'mRNA. Pertanto, è necessario il controllo dell’integrità dell’mRNA, della percentuale di mRNA intatto, della percentuale di frammenti di mRNA e così via”.
Analisi |
Metodi |
Integrità dell'mRNA |
AGE, Agarosiogel elettroforesi |
CGE-LIF, elettroforesi su gel capillare con rilevamento della fluorescenza indotta dalla luce |
L'elettroforesi su gel di agarosio è una tecnica ampiamente utilizzata per valutare l'integrità dell'RNA totale. Ciò comporta l'esecuzione del campione di RNA su un gel di agarosio denaturante, colorato con bromuro di etidio o SYBR Green. Il gel denaturante, composto da agarosio, facilita la separazione dell'RNA in base alle dimensioni quando viene applicata una corrente elettrica. Mentre l'RNA carico negativamente migra verso l'estremità positiva del gel, i frammenti più piccoli si muovono più rapidamente, determinando uno smistamento delle molecole di RNA in base alla dimensione.
L'elettroforesi su gel capillare (CGE) rappresenta un approccio analitico ad alta risoluzione fondamentale per misurare l'integrità delle molecole di RNA in base alla lunghezza. Questa valutazione è importante per la garanzia della qualità, la comprensione della potenza e l'ottimizzazione dei processi di produzione. Simile all'elettroforesi su gel di agarosio, la CGE utilizza una corrente elettrica per separare i frammenti di RNA in base alla loro carica e dimensione. Nella CGE, un capillare viene riempito con una matrice di gel di separazione infusa con un colorante fluorescente. Il movimento dell'RNA lungo il capillare dipende dalle sue dimensioni e il rilevamento viene ottenuto utilizzando rilevatori a raggi ultravioletti (UV) o a fluorescenza indotta dalla luce (LIF).