La magie de P. pastoris : façonner la production de protéines recombinantes

Les protéines recombinantes, qui sont des protéines exprimées dans des cellules hôtes par des techniques de génie génétique, ont trouvé de nombreuses applications dans la recherche biomédicale, la thérapie et le diagnostic. Le choix d'un système d'expression approprié est un facteur crucial pour l'expression réussie des protéines recombinantes.

Yaohai Bio-Pharma bénéficie de plus d'une décennie d'expérience dans la construction et la production de bibliothèques de souches de levures. Dans cet article, Yaohai détaillera les détails du système d'expression de la protéine recombinante Pichia pastoris (P. pastoris).

P. pastoris comme système d'expression de protéines recombinantes

P. pastoris, en tant que levure méthylotrophe, est capable d'utiliser efficacement des composés C1 tels que le méthanol, ce qui en fait un hôte idéal pour la production de protéines recombinantes. Le processus consiste à introduire un vecteur portant l'ADN cible dans la levure, en exploitant les propriétés cellulaires eucaryotes de la levure pour exprimer la protéine recombinante. Le système d'expression génique hétérologue utilisant P. pastoris comme hôte s'est développé rapidement ces dernières années et est reconnu comme un outil important et largement accepté en biologie moléculaire pour la production de protéines recombinantes.

Stratégie pour la P. pastoris système d'expression

Stratégies d'optimisation pour P. pastoris processus de fermentation

Pour améliorer l'efficacité des processus de fermentation, il est essentiel d'intégrer les manipulations de souches et d'adopter diverses stratégies pendant la fermentation de P. pastoris. Bien qu'il existe des conditions couramment utilisées pour la fermentation de P. pastoris, les conditions optimales dépendent fortement du produit souhaité, de la composition génétique utilisée et du fait que la régulation du produit soit obtenue par un promoteur constitutif ou inductible. Les facteurs clés pour une amélioration, une optimisation et une simulation réussies chez P. pastoris comprennent l'ajustement des paramètres de fermentation, la sélection des modes opératoires et l'utilisation de modèles mathématiques. L'optimisation du processus de fermentation implique la sélection précise de paramètres tels que la température, le pH, la composition du milieu et l'oxygène dissous, ainsi que l'adoption de modes opératoires appropriés comme la fermentation continue et par lots alimentés. De plus, des modèles métaboliques à l'échelle du génome et des méthodes mathématiques peuvent être exploités pour affiner l'optimisation du processus de fermentation.

Conclusion

Par rapport aux bactéries, P. pastoris, en tant qu'organisme eucaryote, présente des avantages uniques dans le processus de fermentation. Par conséquent, P. pastoris est reconnu comme une plateforme microbienne majeure pour la production de protéines recombinantes. Pour obtenir le rendement élevé de la protéine souhaitée, une optimisation du processus est nécessaire.

Le développement efficace et rapide de banques de cellules est essentiel au processus de lancement du produit. Si vous avez besoin de construire des souches de levures P. pastoris ou autres, Yaohai peut vous fournir une vaste expérience en matière de construction de banques de cellules microbiennes, des conseils réglementaires professionnels, ainsi que des services CDMO à guichet unique. Nous avons conçu une feuille de route de développement raisonnable qui minimise le cycle de développement CMC des produits biologiques recombinants tout en évitant les risques.

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