méthodes de Purification d'ARNm Mises à Jour en 2024

La purification, une étape cruciale dans la production d'ARNm, consiste à éliminer les impuretés telles que des produits chimiques non réagis ou des résidus.

Le processus de purification assure une cohérence entre les lots d'ARNm et de formulations de nanoparticules lipidiques (NPL), en supprimant les composants instables et en améliorant ainsi leur biodisponibilité et leur efficacité in vivo.

Voici plusieurs méthodes de purification courantes :

1. Précipitation au chlorure de lithium : l'ARN forme des complexes avec le chlorure de lithium et l'alcool, se précipitant ensuite, suivi d'une centrifugation pour séparer le précipité d'ARN afin de purifier celui-ci ;

2. Purification par perles magnétiques : Les perles magnétiques modifiées à la surface se lient de manière sélective à l'ARN, permettant une purification rapide et efficace grâce à un mouvement contrôlé dans un champ magnétique ;

3. Chromatographie par affinité : En utilisant l'affinité entre l'ARNm polyA et l'oligo dT pour capturer l'ARN et éliminer les impuretés ;

4. Chromatographie par échange ionique : En exploitant les différences dans les interactions entre l'ARN et les groupes d'échange ionique, la séparation et la purification de l'ARN sont réalisées en ajustant la force ionique et le pH dans la colonne d'échange ionique.

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