Méthodes de purification de l'ARNm mises à jour en 2024

La purification, une étape cruciale dans la production d’ARNm, consiste à éliminer les impuretés telles que les produits chimiques n’ayant pas réagi ou les matières résiduelles.

Le processus de purification garantit la cohérence d'un lot à l'autre des formulations d'ARNm et de nanoparticules lipidiques (LNP), éliminant les composants instables et améliorant ainsi leur biodisponibilité et leur efficacité in vivo.

Voici plusieurs méthodes de purification courantes :

1. Précipitation du chlorure de lithium:L'ARN forme des complexes avec le chlorure de lithium et l'alcool, précipitant, suivi d'une centrifugation pour séparer le précipité d'ARN en vue de sa purification ;

2. Purification par billes magnétiques : Les billes magnétiques à surface modifiée se lient sélectivement à l'ARN, permettant une purification rapide et efficace via un mouvement contrôlé avec un champ magnétique ;

3. Chromatographie d'affinité : Utilisant l’affinité entre l’ARNm polyA et l’oligo dT pour capturer l’ARN et éliminer les impuretés ;

4. Chromatographie par échange d'ions : En tirant parti des différences dans les interactions entre l’ARN et les groupes d’échange d’ions, la séparation et la purification de l’ARN sont obtenues en ajustant la force des ions et le pH dans la colonne d’échange d’ions.

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