In vitro -transkription (IVT) mRNA:n valmistusprosessissa tarvitaan linearisoitua plasmidi-DNA:ta IVT:n transkriptiotemplaattina T7-RNA-polymeraasin avulla. Korkealaatuinen plasmidi-DNA on ratkaisevan tärkeä in vitro -transkriptiolle.
Kypsään plasmidin valmistuspalvelualustaan perustuen Yaohai Bio-Pharma voi tarjota linearisoidun plasmidi-DNA:n valmistuspalvelun, joka on erittäin puhdas ja korkeatasoinen tehokkaan IVT-transkription saavuttamiseksi.
Palvelujen tiedot
| Käsitellä asiaa | Valinnainen palvelu | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (työpäivä) |
| Pyöreän plasmidin valmistus | Geenisynteesi | Geenisynteesi (kolmannen osapuolen) | 7-10 |
| Plasmidin monistus | Plasmidin monistus | 2 |
| Plasmidin uuttaminen |
| Linearisoidun plasmidin valmistus | Plasmidin linearisointi ja puhdistus | Plasmidin linearisointi | 1 |
| Linearisointi DNA:n puhdistus |
| Plasmidi-DNA:n laadunvalvonta | Konsentraation puhtaus | Ultravioletti (UV) spektrofotometria | 1-2 |
| Plasmidin konformaatio | Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) |
| Kapillaarielektroforeesi (CE) - valinnainen |
| Tunnista plasmidi | Restriktioentsyymin tunnistus/ AGE |
Ominaisuuksemme
Linearisointimenetelmien joustava valikoima
DNA-uutto- ja puhdistusmenetelmien optimointi korkean talteenottoasteen saavuttamiseksi.
Tiukat prosessinohjausstandardit, plasmidinäytteiden superkierteinen konformaatioaste tutkimukseen yli 80 %.
- Aikuisen alustan prosessi
Korkeatasoiset ja tehokkaat plasmidien valmistus- ja laadunvalvontapalvelut kokeellisiin tarpeisiin.
Tapaustutkimus
Kun otetaan esimerkkinä Yaohai Bio-Pharma -luettelon mRNA_lusiferaasituote, transkriptiotemplaattiplasmidinäytteen (tutkimuslaatu) superkierteinen suhde on yli 90 %, linearisaatiosuhde lähellä 100 % ja myöhemmä transkriptiosuhde jopa 1:200 ( linearisoitu plasmidi-DNA:mRNA).
mRNA_lusiferaasi, joka on saatu valmistamalla linearisoitu plasmidi templaattina, transfektoidaan 293T-soluihin, ja entsyymi-substraattireaktioaktiivisuus arvioidaan 24 tuntia transfektion jälkeen.
Ilmeinen voimakas lusiferaasiaktiivisuussignaali voidaan havaita, eli lusiferaasiproteiini ekspressoituu tehokkaasti, mikä viittaa siihen, että transkriptiotemplaatin puhtaus voi täysin täyttää korkealaatuisen mRNA-valmisteen vaatimuksen.
Supercoiled Plasmid Ratio -määritys
Lusiferaasi-mRNA:n ilmentymisen validointi in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
