CircRNA:n valmistus vaatii lineaarista RNA:ta prekursorimateriaalina (RNA-esiaste) syklisointia varten, jossa RNA-prekursori valmistetaan yleensä käyttämällä linearisoitua plasmidi-DNA:ta transkriptiotemplaattina ja transkriptoidaan in vitro T7-RNA-polymeraasin avulla.
Korkealaatuinen plasmidi-DNA on välttämätön in vitro -transkriptiolle (IVT). Kypsään plasmidivalmistuspalvelualustaan perustuen Yaohai Bio-Pharma voi tarjota erittäin puhtaan ja standardinmukaisen linearisoidun plasmidi-DNA:n (pDNA) valmistuspalvelun IVT-tuotteiden eheyden varmistamiseksi.
Palvelujen tiedot
| Käsitellä asiaa | Valinnainen palvelu | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (työpäivä) |
| Pyöreän plasmidin valmistus | Geenisynteesi | Geenisynteesi (kolmannen osapuolen) | 7-10 |
| Plasmidin monistus | Plasmidin monistus | 2 |
| Plasmidin uuttaminen |
| Linearisoidun plasmidin valmistus | Plasmidin linearisointi ja puhdistus | Plasmidin linearisointi | 1 |
| Linearisointi DNA:n puhdistus |
| Plasmidi-DNA:n laadunvalvonta | Konsentraation puhtaus | Ultravioletti (UV) spektrofotometria | 1-2 |
| Plasmidin konformaatio | Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) |
| Kapillaarielektroforeesi (CE) - valinnainen |
| Tunnista plasmidi | Restriktioentsyymin tunnistus/ AGE |
Ominaisuuksemme
Linearisointimenetelmien joustava valikoima
DNA-uutto- ja puhdistusmenetelmien optimointi korkean talteenottoasteen saavuttamiseksi.
Tiukat prosessinohjausstandardit, plasmidinäytteiden superkierteinen konformaatioaste tutkimukseen yli 80 %.
- Aikuisen alustan prosessi
Korkeatasoiset ja tehokkaat plasmidien valmistus- ja laadunvalvontapalvelut kokeellisiin tarpeisiin.
Tapaustutkimus
Kun otetaan esimerkkinä Yaohai Bio-Pharman tuote mCherry circRNA, transkriptiotemplaattiplasmidinäytteiden superkierteinen suhde (tutkimuslaatu) on yli 70 % ja linearisaatioaste lähes 100 %.
mCherry circRNA valmistetaan linearisoidulla plasmidilla templaattina ja transfektoidaan 293T-soluihin. Korkea fluoresenssin ilmentymistaso (punainen fluoresenssi) havaitaan 24 tunnin transfektion jälkeen, mikä voimistuu 48 tunnin kuluttua, ja se voidaan edelleen havaita 7. ja 14. päivänä transfektion jälkeen.
mCherry-proteiini ekspressoituu stabiilisti ja tehokkaasti, ja transkription templaatin puhtaus voi täyttää korkealaatuisen circRNA-lääketuotteen (DP) vaatimuksen.
mCherry circRNA:n in vitro -ekspression validointi
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
