Kapseloinnin perusta on jakelujärjestelmän suunnittelu ja kehittäminen. Hyvin suunniteltu kuljetusjärjestelmä mahdollistaa sircRNA-molekyylien pääsyn kehoon ilman RNA-entsyymien hajottamista, minkä jälkeen ne kuljetetaan tehokkaasti kohdekohtaan, kulkeutuvat solukalvon läpi ja vapautuvat solunsisäisesti.
Lipidinanohiukkaset (LNP:t) ovat paras saatavilla oleva jakelujärjestelmä, jolla on etuja kapseloinnissa, in vivo -ilmentymisessä ja in vivo -turvallisuudessa muihin antojärjestelmiin verrattuna. Nukleiinihappofragmentteja sisältävät LNP:t nieltyvät helposti soluihin ja muodostavat solunsisäisiä kappaleita. Kun soluun pääsee, solunsisäisen kehon hapan ympäristö protonoituu ja lataa positiivisesti ionisoidun lipidin päätä, fuusioituen siten solunsisäisen kehon sisäkalvon kanssa ja vapauttaen kohdenukleiinihapon soluun toimintaan.
Yaohai Bio-Pharma circRNA-palvelu paranee edelleen ja voi tarjota circRNA-LNP-kapselointipalvelua asiaankuuluvien kriittisten prosessiparametrien optimoimiseksi ja circRNA-lääketuotannon johdonmukaisuuden ja toistettavuuden parantamiseksi.
Käsitellä asiaa | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (päivä) | Tuotokset |
sircRNA-LNP-kapselointi | Materiaalien ja nesteen esikäsittely | 2 | sircRNA-LNP-lääketuote (DP) |
Mikrofluidinen laitesekoitus | |||
Tangentiaalinen virtaussuodatus | 1 | ||
Steriloiva suodatus | |||
circRNA-LNP laadunvalvonta | Kapseloinnin tehokkuus | 1 | Testiraportti |
Partikkelikoko ja polydispersiteettiindeksi | |||
Zeta-potentiaali |
Nopea synteesi, korkea T&K-tehokkuus ja esioptimoidut ratkaisut;
Kapselointisuhde voi olla yli 90 %;
Lipidinanohiukkasten kokoa voidaan säätää muuttamalla nesteen ruiskutusnopeutta ja -suhdetta;
sircRNA-LNP-tuotteet validoidaan in vitro -soluekspressiolla, ja ne voivat ekspressoida kohdeproteiinia tehokkaasti.
LNP-eGFP sircRNA-näytteet valmistetaan ja niiden eri annokset (1 ug, 2 ug ja 4 ug) transfektoidaan suoraan 293T-soluihin sen varmistamiseksi, voivatko ne ekspressoida kohdeproteiinia. 48 tunnin transfektion jälkeen voidaan havaita selkeä fluoresoiva signaali, ja fluoresenssin intensiteetillä on annosta eskaloiva vaikutus.
Lipo-circ_eGFP, joka koostuu liposomista ja kapseloimattomasta eGFP-circRNA:sta, otetaan kontrolliksi.