Keskeisen dogman mukaan, messenger RNA (mRNA) on silta geenimateriaalin siirrossa DNA:sta proteiinien luokseen.
mRNA toimii biologisena mekanismiana koodaten proteiineja elossa, ja eukaryottien kypsä mRNA koostuu viidestä komponentista: 5' Kapu (kapustruktuuri), 5' UTR (koodaamaton alue), ORF (avoin lukuketju), 3' UTR, ja 3' polyA-häntä (polyadylylaattihäntä).
Palveluiden yksityiskohdat
| Prosessi |
Valinnaiset palvelut |
Palvelun yksityiskohdat |
Toimitusaika (päivä) |
| mRNA-sekvenssin suunnittelu ja optimointi |
Koodaavien sekvenssien suunnittelu ja optimointi |
CDS-sekvenssin tasaus
CDS-koodonin optimointi
|
1 |
| Ei-koodaavien jonojen suunnittelu ja optimointi |
5' UTR-jonon suunnittelu ja optimointi
3' UTR-jonon suunnittelu ja optimointi
polyA-jonon suunnittelu ja optimointi
|
1-2 |
Muokattavissa olevat vaihtoehdot
| 5’ UTR\/3’ UTR |
- Luonnollinen UTR-jono
- Mutantti\/Suunniteltu UTR-jono
|
| 3' PolyA-häntä |
- 100A ~120A Häntä (suositeltu)
- Jakautunut polyA-häntä
- Muu mukautettu häntä
|
Yleiset strategiat mRNA-sekvenssien suunnitteluun
| mRNA-komponentit |
Biologiset toiminnot |
Optimointistrategiat |
| 5' kypärä |
Suojaa mRNA:ta exonuklease-erottamiselta ja toimii yhdessä polyA-hännän kanssa 3' päässä, polyA-sidonta-proteiinilla ja käännöksen alustusproteiinilla aloittaakseen proteiinin käännöstä. |
Luonnollinen Cap1-rakenne välttää kaavio-tunnistusreseptoreita ja vähentää siten luonnonvaraisen keuhkosuojelun vastausta, mikä voidaan saavuttaa yhdessä transkription kanssa tapahtuvalla tai kahden vaiheen enzyymillä tapahtuvalla kappaleella [ks. mRNA:n enzyymillä tapahtuva kappale ja yhdessä transkription kanssa tapahtuva kappale lisätietoja varten]. |
| 5' UTR |
5' UTR:t voidaan tunnistaa ribosomien toimesta, ne säätelevät mRNA:n kääntämistä ja vaikuttavat mRNA:n vakauden. |
Sisältävät Kozak-sekvenssejä ilman erittäin vakiintunutta toissijarakennetta. Luonnolliset UTR:t korkeasti ilmaantuvista geeneistä ovat suosittuja in vitro -transkriptioon (IVT) mRNA:ksi, kuten α-globiini ja β-globiini. |
| CDS |
Proteiinien koodaavat alueet ja koodausjonoja antigeeneille, antikeineille tai muihin toimiville proteiineille. |
Kodonin optimointi lisää käännöksen tasoa, huomioon ottaen, että joitain ei-optimaalisia kodoneja voi olla merkityksellisiä proteiinin kaatumisessa. |
| 3’ UTR |
Säätelevät mRNA:n käännöstä ja vakautta. |
Luonnolliset UTR:t korkeasti ilmaantuvista geeneistä ovat suosittuja IVT-mRNA:ksi, kuten α-globiini ja β-globiini. |
| 3' polyA hännät |
Säätelevät proteiinin ilmaantumista ja suojavat kappaleen rakennetta hajoamiselta. |
Tarvittava pituus (100-150 bp) on välttämätön; polyA-häntän koodaaminen transkriptioesityspleteissa varmistaa tarkemman polyA-hännän pituuden. |
Ominaisuutemme
- Monipuolinen UTR-lähdevalinta
Useita lähdeaineistoja korkeasti ilmeisistä luonnollisista & muokatuista UTR-kirjastoista; aikuisten UTR-muokkausstrategia;
- Edistyksellinen CDS-optimoitujen tiimi
Yhteistyö ammattimaisen tekoälyalgoritmin tiimin kanssa suorittaakseen koodonien optimoinnin.
- Tasainen polyA-hännän jakautuminen
Lisää polyA-sekvenssejä DNA-esityspohjien mukaan, jotta voit hallita mRNA:n pituutta tarkemmin.
- Monipuoliset optimointikombinaatiot
Saatavutettu tehokas mRNA-ilmaisu alhaisella immunogeneisyys tasolla.
Tapaustutkimus
Kahden raportoijan mRNA:n sekvenssityyppi: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharma:n mRNA-palvelu jatkaa kehittämistään kaksinkertaisen raporttijenettä sisältävän tandemjonojen suunnittelulla ja optimoinnilla, mikä saavuttaa kaksinkertaisen geenin yhteistolkituksen.
Käyttämällä perinteistä transfektioaineesta kaksinkertainen geeni-tandemjono mCherry-eGFP mRNA:ta transfektoidaan 293T-soluihin, ja kaksi fluoresenssiosignaalia mCherry (punainen) ja lisätty vihersydeproteiini (eGFP) havaitaan samanaikaisesti 48 tunnin kuluttua, ja叠加-kuvio korostetaan keltaisella.
MCherry-eGFP mRNA:n ilmaisin 293T-soluissa
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
