Plasmidi DNA, jota käytetään in vitro transkriptioon (IVT) mallimateriaalina, on tärkeä raaka-aine mRNA:n valmistuksessa. Korkea tuotos, korkea puhtaus ja korkea plasmidi DNA:n palautus on pääasiallinen tavoite plasmidi-prosessin kehittämisen aikana.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa yhdenmukaisen ratkaisun plasmidi-kehitykseen, mukaan lukien ylävirtaisen (fermentaatio), alavirtaisen (puhdistus) prosessin kehittämisestä, prosessin karakterisoinnista ja validoinnista. Meillä on laaja kokemus plasmidi-tuotannon parantamisessa ja sen erottamisesta monimutkaisista sekoituksista kehittämällä ja optimoimalla fermentointi-, puhdistus- ja saasteiden poistoprosesseja.
Perustavat bioprosessit plasmidi-valmistuksessa sisältävät: Escherichia coli (E. coli) fermentaation, solujen keräämisen ja alkalilysing, selkeyttämisen, keskittämisen, kolmen vaiheen kromaatografia-prosessin (kiinnitys, väliyhdisteiden puhdistus ja loppupuhdistus) sekä keskittämisen.
Palvelun yksityiskohdat | Yksikkötoiminnot | Parametrit |
E. coli hajautus |
Hymäysflaski | Kasvimedia, antibiootti, siemenmateriaalin tilavuus, kasvu lämpötila ja muut. |
Fermento (7 L) |
Antibiootti, siemenmateriaalin tilavuus, kasvu lämpötila, pH, ratkennut happee (DO), syöttötapa (esim. syöttöjaksollinen), syöttömedia, fermentaatioaika ja muut. |
|
Solun kerääminen | Mikrofiltraatio | Standardi E. coli keräämisprosessi |
Solun lysis | Solujen uudelleenkeskittyminen, alkalilysyys, neutralisointi | Alkalinumero, lysausaika |
Selkeys | Suodatus | Raa'asuojaus, 20 µm ja 5 µm suodinjono (suosittu) |
Keskittyminen | Ultrafiltraatio, tangentiaalikulma-suodatus | Poresuuruus (tai NMWC), Transmembrani-paine (TMP), Flux, suodatteen tilavuus suhteessa membraanin pinta-alueeseen |
Kolme vaihetta kromatografiaan | Kokoerottelukromatografia (SEC) tai geelisuoduskromatografia (GFC) | Sarakkeen pituus ja halkaisija, perusteuimaannostumus, injektiovolume, liikkuvan fasen rakenne (adsorptio ja desorptio), pH, virtausnopeus, tasapainottaminen, sidonta, pesu ja eristysolosuhteet. |
Afiinitetskromatografia (AF) | ||
Negatiivisti varautuvakromatografia (AEX) | ||
Keskittyminen | Ultrafiltraatio, tangentiaalikulma-suodatus | Poresuuruus (tai NMWC), Transmembrani-paine (TMP), Flux, suodatteen tilavuus suhteessa membraanin pinta-alueeseen |
Lisää biologisten aineiden puhdistusprosessi-ratkaisuja |