Encapsulaation perusta on toimitusjärjestelmän suunnittelu ja kehittäminen. Hyvin suunniteltu toimitusjärjestelmä mahdollistaa circRNA-molekyylien pääsyn kehoon niin, etteivät ne hajoudu RNA-ensiimien aiheuttamasta degradaatiosta ja että ne toimitetaan tehokkaasti kohteeseen, ylittävät solukalvon ja vapautuvat intrasolulisesti.
Lipidi nanopartikkelit (LNPs) ovat parhaita saatavilla olevia toimitusjärjestelmiä, joilla on etuja encapsulaatiossa, eläinmalliesityksessä ja turvallisuudessa vertaillen muiden toimitusjärjestelmien kanssa. Nukleinsyöttöfragmentit sisältävät LNPs:t kulkeutuvat helposti soluihin ja muodostavat intrasoluliset kehot. Kun ne pääsevät soluun, intrasoluisen kehon hapaninen ympäristö protonoimaa ja varustaa ionisoituneen lipidi-pään positiivisella ladulla, mikä johtaa sen sulautumiseen intrasoluisen kehon sisäkalvoon ja kohdenukleinsyötön vapauttamiseen soluun vaikutusta varten.
Yaohai Bio-Pharma circRNA-palvelu kehittyy jatkuvasti ja voi tarjota circRNA-LNP-pakkauspalvelua, joka optimoi aiheeseen liittyvät keskeiset prosessiparametrit ja parantaa circRNA-lääkkeen tuotannon yhtenäisyyttä ja toistettavuutta.
Prosessi | Palvelun yksityiskohdat | Toimitusaika (päivä) | Toimitteet |
circRNA-LNP-pakkaus | Materiaalin ja vedesteen esikäsittely | 2 | circRNA-LNP-lääkeprodukti (DP) |
Mikrofluidiikkalaitteen sekoitus | |||
Tangentiaalinen virtausfiltrointi | 1 | ||
Steriliisointisuodatus | |||
circRNA-LNP-laadunvalvonta | Kapselointitehokkuus | 1 | Testiraportti |
Hiukkasen koko ja polydisperisuusindeksi | |||
Zeta-potentiaali |
Nopea synteesi, korkea R&D-tehokkuus ja ennakoivat ratkaisut;
Pakkaussuhde voi saavuttaa yli 90%;
Lipidihiukkasten koko voidaan ohjata muuttamalla virtausnopeutta ja suhdetta;
circRNA-LNP-tuotteet on vahvistettu in vitro soluilla ja ne voivat ilmaista kohdeproteiinin tehokkaasti.
LNP-eGFP circRNA-näytteitä valmistetaan, ja niiden eri annokset (1ug, 2ug ja 4ug) transfektoidaan suoraan 293T-soluihin vahvistaakseen, voivatko ne ilmaista kohdeproteiinia. Transfektiosta 48 tunnin jälkeen voidaan havaita selvä fluoresenssisignaali, ja fluoresenssin intensiteetillä on annoksen mukainen kasvuvaikutus.
Lipo-circ_eGFP, joka koostuu liposomista ja epäpeittämästä eGFP circRNA:sta, käytetään vertailukohteena.