تولید پروتئین نوترکیب: سویه های E. coli مهندسی شده

اشریشیا کلی (E. coli) نقش مهمی در تولید پروتئین های نوترکیب در صنعت بیوداروسازی ایفا کرده است و به عنوان اولین ناقل بیان برای تولید داروهای بیولوژیکی عمل می کند. E. coli دارای رشد سریع، دستکاری ژنتیکی راحت، و سنتز سریع پروتئین های نوترکیب، از جمله مزایای دیگر است. تغییرات گسترده E. coli را به گزینه ای بهینه برای بیان پروتئین تبدیل کرده است که منجر به طراحی سویه های مهندسی شده مختلف E. coli شده است.

Yaohai Bio-Pharma در ارائه خدمات برون سپاری یک مرحله ای برای تخمیر، خالص سازی، توسعه فرآیند فرمولاسیون و تولید مجموعه ای از بیوداروها با استفاده از سیستم های بیان E. coli تخصص دارد. با توجه به تجربه گسترده Yaohai، ما خلاصه کردیم که چهار سویه رایج E. coli برای تولید پروتئین نوترکیب و ویژگی‌های آنها استفاده می‌شوند.

سویه BL 21

سویه BL21 که از دودمان E. coli B مشتق شده است فاقد پروتئاز Lon و پروتئاز غشای خارجی OmpT است. پروتئاز Lon در درجه اول پروتئین های اگزوژن را تجزیه می کند، در حالی که OmpT عمدتاً پروتئین های ماتریکس خارج سلولی را تجزیه می کند. عدم وجود این دو پروتئاز کلیدی می تواند به طور موثری از تخریب پروتئین های نوترکیب جلوگیری کند.

سویه اوریگامی

سویه اوریگامی، مشتق شده از E. coli K-12، دارای جهش هایی در تیوردوکسین ردوکتاز و گلوتاتیون ردوکتاز است که تشکیل پروتئین های به درستی تا شده حاوی پیوندهای دی سولفیدی را تسهیل می کند و حلالیت پروتئین را افزایش می دهد. سویه اوریگامی از جمله اوریگامی، اوریگامی 2 و اوریگامی B برای بیان پروتئین های فعال حاوی پیوندهای دی سولفیدی مناسب هستند.

کرنش SHuffle

سویه SHuffle به طور اساسی پیوند دی سولفید ایزومراز DsbC را در سیتوپلاسم بیان می کند و باعث تشکیل پیوندهای دی سولفیدی صحیح در پروتئین های اکسید شده می شود. همچنین به عنوان یک پیشخوان مولکولی برای تا کردن پروتئین عمل می کند و به شکل گیری ترکیب صحیح کمک می کند.

سویه روزتا

سویه روزتا با هدف بهبود سطح بیان ژن‌های اگزوژن، به‌ویژه ژن‌های یوکاریوتی، در سیستم‌های پروکاریوتی، E. coli را با tRNA‌های مربوط به کدون‌های کمیاب مکمل می‌کند. که از BL21 مشتق شده و حامل پلاسمید pRARE مقاوم به کلرامفنیکل است، شش tRNA مربوط به کدون های کمیاب (AUA، AGG، AGA، CUA، CCC و GGA) را که در ابتدا در E. coli وجود ندارد، تکمیل می کند و بیان پروتئین «جهانی» تری را ارائه می دهد.

نتیجه

سه عامل اصلی برای تولید موفق پروتئین های نوترکیب، شرایط میزبان، ناقل و کشت است. بر اساس درک خواص فیزیکوشیمیایی پروتئین نوترکیب، مزایای منحصر به فرد هر سویه و نیازهای خاص آزمایش، مناسب ترین میزبان باید انتخاب شود. علاوه بر این، عواملی مانند بردارهای پلاسمید، دما و القاء کننده ها باید برای افزایش بیان پروتئین بهینه شوند.

Yaohai Bio-Pharma نیز فعالانه به دنبال شرکای سازمانی یا فردی جهانی است و رقابتی ترین غرامت را در صنعت ارائه می دهد. اگر سوالی دارید، لطفا با ما تماس بگیرید: [email protected]