حمایت از روش‌های تغییر RNA گزارشگر

هنگامی که در میان روش‌های مختلف تغییرات mRNA گزارشگر انتخاب می‌کنید، پاسخ قطعی وجود ندارد زیرا هر روش و ژن گزارشگر دارای مزایای خود و سناریوهای کاربردی است. اینجا برخی از روش‌های متداول تغییرات mRNA و ژن‌های گزارشگر به همراه ویژگی‌ها و مناسب بودن آن‌ها آورده شده است.

روش‌های تغییرات mRNA

متیل‌سازی:

1. m6A : با پایداری mRNA، جداسازی، ترجمه و پردازش miRNA مرتبط است. چالش‌های تشخیص شامل انتخاب آنتی‌بادی و محل‌یابی است.
2. nm سر 5' : پایداری، جداسازی، پلی‌آدنیلاسیون و صادرات هسته‌ای را افزایش می‌دهد. کمک می‌کند تا RNA خود را از RNA خارجی تمیز کند.
3. پseudo-وریدیلاسیون : کدون‌ها را تغییر می‌دهد، پایداری را افزایش می‌دهد و به تنش‌ها پاسخ می‌دهد. توسط پseudo-وریدین سنتزاس‌ها کاتالیز می‌شود.

معرفی نوکلئوتید‌های غیرطبیعی:

1. مدخل شده در طی ترجمه با استراتژی دوگانه اصلاح شیمیایی. این کار از پایداری، کارایی و بیان پروتئین افزایش می‌دهد.

ژن‌های گزارشگر

1. ژن پروتئین فلوrescent سبز (GFP) : مزایا: آسان به شناسایی، خواص فلورسنت پایدار، غیر سمی برای سلول‌ها، مناسب برای تصویربرداری سلول زنده. معایب: شدت فلورسنت محدود.
2. پروتئین فلوrescent سبز افزایش یافته (eGFP) : مزایا: بیش از شش برابر روشن‌تر از GFP نوع وحشی، که آن را مناسب‌تر برای استفاده به عنوان ژن گزارشگر در مطالعه بیان ژن، تنظیم، تفکیک سلول و محلول‌سازی و حمل پروتئین در داخل سازواره‌ها می‌کند.
3. پروتئین‌های فلوrescent قرمز (به عنوان مثال، mCherry) : مزایا: طول موج های تحریک و اmissیون بلندتر، که منجر به کاهش پس زمینه در تصویربرداری درون سلولی می‌شود، فلورسنت روشن و فوتاستابیلیت عالی و سمیت کمتر برای سلول‌ها. معایب: ممکن است در شرایط آزمایشگاهی خاص به اندازه GFP مورد استفاده قرار نگیرد.
4. لوسیفراس آتش‌باز : مزایا: در حضور ATP، یون‌های مگنز و اکسیژن، قادر به کاتالیز اکسیداسیون لوئیسیرین به اکسیلوئیسیرین است که نور بیولومنیسنت تولید می‌کند. این آنزیم مناسب برای استفاده به عنوان کنترل برای مطالعه کارایی ترجمه ژن‌های هدف در سلول‌های پستاندار، تعیین زنده‌بودن سلول و آزمایش‌های تصویربرداری در جسم زنده است.

نتیجه گیری

هنگامی که باید تصمیم بگیریم کدام روش اصلاح mRNA گزارشگر مناسب‌تر است، این موضوع به اهداف تجربی خاص، زمینه‌های تحقیقاتی و شرایط تجربی بستگی دارد. به عنوان مثال، اگر نیاز به حساسیت بالا باشد، eGFP ممکن است انتخاب بهتری باشد. اگر نیاز به تصویربرداری در طول موج‌های بلند‌تر برای کاهش اغتشاش پس‌زمینه وجود داشته باشد، پروتئین‌های فلوreseانت قرمز مانند mCherry ممکن است مناسب‌تر باشند. علاوه بر این، بر اساس نیازهای خاص اصلاح mRNA (مانند افزایش ثبات یا بهبود کارایی ترجمه)، می‌توان روش اصلاح متناظر را انتخاب کرد.

به‌عنوان نخستین و بزرگترین CRDMO زیستی میکروبی در بزرگ‌چین، Yaohai Bio-Pharma راه‌حل‌های سفارشی یکپارچه یا خدمات مستقلی از جمله سنتز RNA، مهندسی و ساخت ریزه، توسعه فرآیندهای بالا‌دست و پایین‌دست تا تولید مواد دارویی تحت شرایط GMP یا غیر-GMP و خدمات پر کردن و پوشش برای انواع مختلف مانند mRNA، circRNA، RNA پلاسمید، پروتئین‌های بازسازی‌شده، پپتیدها، آنزیم‌ها، آنتی‌بادی‌های حوزه تکی و VLPs برای استفاده در انسان و دام عرضه می‌کند.

شرکت Yaohai Bio-Pharma نیز به طور فعال در حال جستجوی همکاران سازمانی یا فردی در سطح جهانی است و کمپنسیشن رقابتی‌ترین صنعت را ارائه می‌دهد. اگر سوالی دارید، لطفاً آزادانه با ما تماس بگیرید: [email protected]