Kas on mingi probleem? Palun võtke meiega ühendust, et teid teenindada!
KüsitlusTsirkulaarsed RNA-d (circRNA) on üheahelalise kovalentselt suletud RNA klass, millel puuduvad 5' või 3' otsad. See ainulaadne omadus võib takistada tsircRNA lagunemist eksonukleaaside poolt ja anda tsirkRNA-le kõrge stabiilsuse ja translatsiooni efektiivsuse võrreldes lineaarse mRNA-ga.
tsircRNA sünteesitakse in vitro tsirkulatsiooni teel lineaarsest RNA prekursorist. Protsessi või tootega seotud lisandid võivad kaasa tuua kaasasündinud immuunvastuse, eriti lineaarsed RNA-d (RNA prekursorid, täkestatud RNA, väljalõigatud intronid). In vitro / vivo uuringute ja terapeutiliste rakenduste jaoks on oluline eemaldada lineaarsed RNA lisandid ja saada kõrge saagisega puhast tsirkul-RNA-d.
Yaohai Bio-Pharma on loonud tsirkRNA sünteesitehnoloogiate komplekti väga puhta tsirRNA saamiseks, mis hõlmab järjestuste kavandamist ja optimeerimist, in vitro transkriptsiooni (IVT), tsirkulariseerimist/tsükliseerimist, puhastavat preparatiivset kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat (HPLC) ja lipiidide nanoosakesi ( LNP) kapseldamine. Kõik tooted vabastatakse rangete kvaliteedikontrolli (QC) standardite alusel.
Saavutused
Toode | Kohandatud väga puhas tsirRNA |
Sünteesimeetod | I rühma introni iseliitumine |
RNA sisu | 100 µg ~ 10 mg (OD260) |
Pikkus | 50-8,000 XNUMX nukleotiidi |
Puhtus | A260 / A280 |
Tuvastage ja puhtus | Agaroosgeelelektroforees (AGE), kõrgefektiivse lipiidikromatograafia (HPLC) |
Fikseeritud | RNaasivaba vesi (vedel) |
Transport TASUTA | Laev kuiva jääga; või ümbritseva õhu temperatuuril |
Säilitamine | Vedel, temperatuuril -20 °C või alla selle; Lüofiliseeritud pulber, temperatuuril 4 °C |
taotlus | LNP preparaadi väljatöötamine, rakupõhised testid, loomkatsed |
Case Studies
Töötasime välja skaleeritava puhastusprotsessi, kasutades peamiselt preparatiivset HPLC-d, ja valmistasime kõrge puhtusastmega (>95%) tsirkul-RNA.
Joonis. Kõrge puhtusastmega (98%) tsircRNA puhastamine ja analüüs