мРНК сінтэзуецца шляхам транскрыпцыі in vitro (IVT) з лінеарызаванай плазмидной ДНК (пДНК). Некаторыя пабочныя прадукты таксама ўтвараюцца падчас працэдуры IVT, у тым ліку двухцепочечная РНК (dsRNA), ідэнтыфікаваная як асноўныя трыгеры для прыроджанага імуннага шляху. Вельмі важна выдаліць прымешкі і атрымаць высокі ўраджай чыстая мРНК для даследаванняў мРНК in vitro/vivo і тэрапеўтычнага прымянення.
Yaohai Bio-Pharma стварыла набор тэхналогій сінтэзу мРНК, каб забяспечыць вельмі чыстая мРНК, такія як распрацоўка і аптымізацыя паслядоўнасці, IVT, ачыстка, ліяфілізацыя і інкапсуляцыя ліпідных наначасціц (LNP). Уся прадукцыя выпускаецца ў адпаведнасці са строгімі стандартамі кантролю якасці. Афінная храматаграфія (AC), заснаваная на моцным і селектыўным узаемадзеянні паміж 3'-хвастом polyA мРНК са стацыянарнай фазай аліга dT, з'яўляецца эфектыўнай і маштабаванай стратэгіяй ачысткі мРНК.
Чаканыя вынікі
| прадукт |
Індывідуальныя вельмі чыстыя мРНК
|
| Даўжыня |
100~10,000 XNUMX нуклеатыдаў |
| Змест РНК |
100 мкг~10 мг (OD260) |
| Чысціня |
A260 / A280 |
| Ідэнтыфікацыя і чысціня |
Электрафарэз у агарозным гелі (AGE)
Капілярны электрафарэз (CE)
|
| Буфер |
Вада без РНКаз (вадкасць) |
| адпраўка |
Карабель з сухім лёдам; або пры тэмпературы навакольнага асяроддзя |
| захоўванне |
● Вадкасць, тэмпература -20°C або ніжэй
● Лиофилизированный парашок, пры 4°C
|
| дадатак |
Распрацоўка рэцэптуры LNP,
Аналізы на аснове клетак, эксперыменты на жывёл
|
Іншыя наладжвальныя параметры
| 5' Кап |
● Без шапкі
● Cap0, са-кап
● Cap1, са-кап
● Cap1, ферментатыўнае кэпаванне
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Паслядоўнасць UTR прыроды
● Паслядоўнасць UTR мутанта/спраектаванай
|
| 3' PolyA хвост |
● 100A ~120A Хвост (рэкамендуецца)
● Сегментаваны поліА хвост
● Іншы карыстацкі хвост
|
| Мадыфікаваныя нуклеазіды |
● Немадыфікаваныя базы,
● Псеўдаурыдын (Ψ),
● N1-метилпсевдоуридин (N1Ψ),
● 5-метилцитозин (m5C),
● 5-метилуридин (m5U),
● 5-метоксиуридин (5moU),
● 2-тыурыдын (s2U),
● 2'-O-пазначаў-U
● іншыя
|
Case Study
Мы распрацавалі працэс шматступеньчатай храматаграфічнай ачысткі і падрыхтавалі мРНК высокай чысціні і цэласнасці (>95%).
Мал. Аналіз мРНК з высокай чысцінёй (>98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
