mRNA сінтэзуюцца шляхам транскрыпцыі віtro (IVT) з лінейнага плазміднага ДНК (pDNA). Падчас процедуры IVT таксама утвораюцца некаторыя побачныя продукты, уключна двуйстароння RNA (dsRNA), якая ідэнтыфікавана як галоўныя спалучыны, якія актыруюць на вядомы імунны шлях. Крытычна важна ўдаліць нязachysці і атрымаць высоkeye выдачы... чыстая mRNA для даследвання mRNA in vitro/in vivo і аплікацый тэрапіі.
Yaohai Bio-Pharma розрыла сістэму тэхналогій сінтэза mRNA, каб працы ўтрымліваюць высокачыстую mRNA , такую як дызайн і аптымізацыя секвенцыі, IVT, чыстаць, ліофілізаваць і энкапсуляваць у ліпідныя наначастынкі (LNP). Усе вытворы выдаюцца пад строгім кантролем якасці. Афінітная хроматаграфія (AC), заснаваная на магутным і выбраным ўздзеянні паміж 3′ polyA хвостам mRNA і стацыяўнай фазай oligo dT, з'яўляецца эфектывнай і маштабуемай стратэгіяй чыстаць mRNA.
Вынікі
| Выrob |
Замоўленая высокачыстая mRNA
|
| Длiна |
100~10,000 нуклеатыдаў |
| Змест RNA |
100 µг~10 мг (OD260) |
| Чыстасьць |
A260/A280 |
| Аднагароду і чыстата |
Электрафарэза ў агарасавай гелю (AGE)
Капілярная електрафарэз (CE)
|
| Буфер |
Вада без RNase (рыдна) |
| Адправка |
Дасылаць з сухім ледам; ці ў амбіентаўнай температуры |
| Храненне |
● Рыдкінь, у ці і паўніж -20°C
● Ліофілізаваны порошок, ў 4°C
|
| Зastosаванне |
Развіццё формулявання LNP,
Кліточныя тэсты, Эксперыменты на жывых
|
Іншыя дапаможныя опцыі
| 5' Кап |
● Без капа
● Cap0, спалучанае капаванне
● Cap1, спалучанае капаванне
● Кап1, энзыматычнае капіруванне
|
| 5’ UTR\/3’ UTR |
● Паслядоўнасць UTR натуральнага паходжання
● Паслядоўнасць UTR мутанта\/інжынеравана
|
| 3' ПоліA хвост |
● хвост 100A ~120A (рэкамендавана)
● Сегмэнтаваны поліA хвост
● Іншы цягамы хвост
|
| Мадифікаваныя нуклеазы |
● Незмяненыя базы,
● Псевдуюрыцын (Ψ),
● N1-Метылпсевдуюрыцын (N1Ψ),
● 5-метылцытызін (m5C),
● 5-метылуюрыцын (m5U),
● 5-метаксуюрыцын (5moU),
● 2-тыйоюрыцын (s2U),
● 2′-O-метыл-U
● Іншыя
|
Прыклад даследвання
Мы развілі многашаговы працэс чысткі хроматографіяй і падгатавалі mRNA з вышынай чыстасцю і цэлкам (>95%).
Рыс. Аналіз mRNA з вышынай чыстасцю (＞98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
