Merhaba. Bilim adamlarının RNA'yı nasıl kopyalayabileceğini merak etmişsindir? RNA, hücrelerimizde bulunan ve protein yapımıyla ilgili birçok işi yapan özel bir molekül. Proteinler ise vücudumuzun doğru işlevleri yerine getirebilmesi için orada bulunur. Bu bölümde, araştırmacılar tarafından kullanılan çok daha ilginç protokolün üzerinden geçeceğiz: In vitro transkript. Ve bu, bilim insanlarının bir test tübünde (bu, laboratuvarlarda kullanılan küçük cam kaplı şeyler) RNA'yı çoğalttığını anlamına gelir, şimdi her adımı ele alalım.
Önceki yazımı tamamladıktan sonra, sonuncusunun biraz kuruy olabileceğini fark ettim-gel lütfen ıslak laboratuvar yazılarına katılın; böylece, artık gerçekten eğlenceli (yani RNA yapma) treninde olduğunuzu biliyorsunuz: EF'niz için hangi reaktiflere ihtiyacınız olacak?? Bunun için, Yaohai ürünündeki ile aynı özel proteoller olan enzimler gereklidir Rekombinant Midkine Üretimi . Kimyasal tepkimeleri kataliz eder, bu enzimler parçalamada yardımcı olur. Şimdi sadece bir parça DNA'mızı almalıyız. Bu fonksiyon, RNA'mızımızı kopyalamak için kullandığımız şablon olarak kullanılan DNA'dır. RNA'daki ek düzenleyici diziler, yani nükleotitler de gereklidir. Bu nükleotitler, RNA'yı yapmak için monte edilmesi gereken küçük yapı taşlarına benzer. Ayrıca, tadı değerlendirmek için diğerlerine karıştırmak üzere küçük çaplı kısa borular da kullanıyoruz. Son olarak, tepkimelerimizin doğru sıcaklıkta olduğundan emin olmamızı sağlayan bir makine (termosikler) gerekiyor. Ayrıca, belirli deneyler için birkaç araç ve ürünün de gerekebilir.
Burada şeyler ayrılır, bir RNA zinciri elde ediyoruz ve şimdi bunun daha fazla kopyasını almak istiyoruz, ayrıca Bağlayıcı VLP Aşısı Üretimi yaohai tarafından geliştirildi. Bu işlemi gerçekleştirmek için başka bir enzim kullanılır; T7 RNA polimeraz. Bu eşsiz enzim, örneğin, RNA içindeki belirli alanları tanır. Daha fazla RNA kopyası yapmak için bir sıçrama konisi gibi çalışır. Bu noktada, T7 RNA polimeraz tarafından RNA zincirine daha fazla eklenecek ve transkript birikimi oluşana kadar veya biz durdurana kadar devam edecektir.
RNA'yi mümkün olduğunca izole ettikten sonra, temizleme ve gelecekteki kullanımlar için saklama yöntemlerini görmek için daha aşağıya kaydırın. Rhoades: Bu yöntemlerden bazıları RNA'yı izole etme açısından biraz daha aşırı tarafta — her zaman bunu kullanmazsınız, ancak bazen belirli deney tipleri için gerekli olabilir. RNA'mız tüm kontaminantlardan arındırıldıktan sonra dondurulmuş halde saklanabilir. Bu şekilde güvenli hale gelir ve ardından çeşitli deneylerde daha sonra kullanabiliriz.
Başlangıç malzemesinin kalitesi: DNA şablonunuzun temiz olduğundan ve tamamen bozulmamış olduğundan emin olun. Başarılı bir deney şansını maksimize etmek için yeniden takviye edilmiş nükleotitlerle ve yeni açılmış enzimlerle desteklenebilir.
Koşulları ince ayarlama: Tüm enzimler ve nükleotitler vücutta belirli bir sıcaklık ve pH'de daha iyi çalışır, aynı zamanda Yaohai'nin içinde de öyle. Kırmızı Fluoresan mRNA . Şimdi koşullar arasında küçük farklılıkları ayarlayın, sizin benzersiz kurulumunuz için anahtar olan noktaya ulaşana kadar deneyin.
Ters transkriptaz, bir RNA molekülünden DNA kopyası yapan nadir bir enzimdir. In vitro transkript metodu ile RNA üretmek için hem DNAs'ları hem de bir DNA şablonu (cDNA) kullandık. Ancak, çoğu deneyde bilim adamları DNA'yı RNA'ya çevirmek ister. Ters transkripsiyon buradan adını almaktadır. mRNA poli-A Dağılımı Testi yaohai tarafından yapılmıştır. Hücreler içindeki RNA moleküllerini incelemekten ileri deneylere kadar tüm bilim dalında değerli bir araçtır.
RNA'nın en yaygın kullanılan moleküler araçlardan biri olduğu gerçek yaşam deneyleri, Yaohai ürünleriyle beraber kullanılmaktadır. E. coli'de VLP Aşısı Üretimi . Kuantitatif analizler: Bu testler, bir örnekte bulunan herhangi bir belirli molekülün miktarını ortaya çıkarabilir. Örneğin, bilim adamları, hücre içindeki hedeflenen bir geninden türetilmiş RNA kopyalarının in vitro transkript hazırlamasını sentezleyebilir. RNA için aradıkları durumda, tanısal yöntem bu kopyalar için bir analiz yapabilir ve ardından birörnekte bu kopyaları artırmak için polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) çalıştırabilir. Bu, bilim adamlarının hücrelerde gen ifadesini nasıl yaptığını görmelerini sağlar ve hatta bazı son derece yüksek verimlilikteki analizleri mümkün kılar, örneğin bakteriyel veya virüssel bir enfeksiyonun varlığı ve genetik bozuklukları teşhis etme gibi.
in vitro Transcript Protocol, mikrobiyal biyolojik ürünler için önde gelen bir CDMO'dur. Odak alanımız, insan, veteriner ve evcil hayvan sağlığı yönetimi için uygun olan mikrobiyal üretilmiş aşılar ve tedaviler üzerine olmuştur. En ileri RD platformlarına ve üretim teknolojilerine sahibiz ki, bu platformlar mikrobiyal şeritlerin geliştirilmesi ve hücre bankacılığından süreç ve yöntem geliştirmesine, ticari ve klinik üreme aşamasına kadar tüm prosedürü kapsar ve yenilikçi çözümlerin başarılı teslimini sağlar. Zamanla, mikrobiyal tabanlı biyolojik işleme konusunda geniş bilgi birikimi kazandık. 200'den fazla proje başarıyla tamamlanmış ve müşterilerimizin US FDA ve EU EMA gibi düzenleyici gerekliliklere uymalarını sağlamaya yardımcı oluyoruz. Ayrıca Avustralya TGA ve Çin NMPA ile ilgili süreçleri de navigasyonlarını destekliyoruz. Profesyonel uzmanlığımız ve kapsamlı deneyimimiz bizi pazar taleplerine hızlı bir şekilde yanıt vermek ve özel CDMO hizmetleri sunmak için donuştur.
Yaohai Bio-Pharma, laboratuvar koşullarında Transkript Protokolü ile oluşturulan biyolojiklerin üretiminde deneyime sahiptir. Hiçbir risk bulunmadığından emin olurken özelleştirilmiş RD ve üretim çözümleri sunuyoruz. Subunit vak辛nlar yenileyici, peptit hormonlar, sinyal molekülleri, büyüme faktörleri, tek-etki alanlı antijenler enzimler, plazmid DNA MRNA ve daha fazlasıyla ilgili çeşitli modalliklere dahil olduk. Ayrıca birçok mikroorganizmada uzmanız,酵母胞 içi ve胞 dışı salgı (lit başına 15 g kadar verim) ve bakteriyel胞 içi çözünür ve包容体 (lit başına 10 g kadar yüksek verim). BSL-2 fermantasyon platformumuzu kullanarak bakteriyel vak辛nlar geliştirdik. Süreçleri iyileştirmeye, ürün verimini artırmaya ve üretim maliyetlerini düşürmeye odaklanıyoruz. Güçlü bir teknoloji ekibini kullanarak, ürününüzü daha hızlı pazar'a çıkarmak için projelerinizi zamanında ve güvenilir bir şekilde tamamlamasını sağlayabiliriz.
Yaohai Bio-Pharma, biyolojik ürünlerin üst 10 üreticisi arasında yer alan ve mikrobiyal fermantasyona odaklanan bir şirket. Güçlü R&D yeteneklerine ve ileri düzeyde ekipmanlara sahip modern bir tesis inşa etmiş bulunmaktayız. Mikrobiyal fermantasyon ve temizleme için GMP gereksinimlerine uygun beş ilac Madde üretim hattı bulunmaktadır. Ayrıca kartrijler, flakonlar ve önceden dolu şırıngeler için iki otomatik doldurma-sıkma hattı da mevcuttur. Kullanılabilir fermantasyon ölçekleri In vitro Transcript Protokolünden 2000L'ye kadar değişmektedir. Bir flakonun doldurulması için belirtiler 1ml'den 25ml'ye kadar değişmektedir. Önceden dolu şırınga veya kartrij doldurma belirtileri yaklaşık olarak 1-3ml arasındadır. cGMP uyumlu üretim teslimamız, klinik örneklerin yanı sıra ticari ürünlerin sürekli sağlanması konusunda güvence sağlar. Tesisimiz, küresel pazarlara sevkiyat yapan büyük molekülleri üretmektedir.
Yaohai BioPharma, in vitro Transcript Protokolünü ve düzenleyici işleri içeren bir Mikrobiyal CDMO'dur. GMP standartlarına ve küresel düzenlemelere uygun bir kalite yönetimi sistemine sahibiz. Düzenleyici uzmanlarımız, biyolojik başlangıçları hızlandırmak için küresel düzenleyici çerçevelerde uzmandır. İzlenebilir üretim süreçleri, kaliteli ürünler sağlama ve ABD FDA ve AB EMA kurallarına uymayı garanti ederiz. Avustralya TGA ve Çin NMPA da memnuniyet duyar. Yaohai BioPharma, GMP kalite sistemimiz ve üretim tesisimiz için Avrupa Birliği'nin Uygun Kişisi (QP) tarafından yapılan yerinde denetimi başarıyla geçmiştir. Ayrıca, ISO9001 Kalite Yönetimi Sistemi, ISO14001 Çevre Yönetimi Sistemi ve ISO45001 İş Sağlığı ve Güvenliği Yönetimi Sistemi ilk sertifikasyon denetimlerini tamamlamış bulunmaktayız.