CircRNA hazırlığı, siklizasyon için öncü malzeme (RNA öncüsü) olarak doğrusal RNA gerektirir; burada RNA öncüsü, genellikle bir transkripsiyon şablonu olarak doğrusallaştırılmış plazmit DNA kullanılarak hazırlanır ve T7 RNA polimerazının yardımıyla in vitro olarak kopyalanır.
Yüksek kaliteli plazmit DNA, in vitro transkripsiyon (IVT) için gereklidir. Olgun plazmid hazırlama hizmet platformunu temel alan Yaohai Bio-Pharma, IVT ürünlerinin bütünlüğünü sağlamak için yüksek saflıkta ve standart doğrusallaştırılmış plazmit DNA (pDNA) hazırlama hizmeti sağlayabilir.
Hizmet Detayları
| Süreç | İsteğe Bağlı Hizmet | Servis Detayları | Teslimat Süresi (İş Günü) |
| Dairesel plazmit hazırlanması | Gen sentezi | Gen sentezi (üçüncü taraf) | 7-10 |
| Plazmid amplifikasyonu | Plazmid amplifikasyonu | 2 |
| Plazmid ekstraksiyonu |
| Doğrusallaştırılmış plazmit hazırlama | Plazmid doğrusallaştırma ve saflaştırma | Plazmid doğrusallaştırma | 1 |
| Doğrusallaştırma DNA saflaştırması |
| Plazmid DNA kalite kontrolü | Konsantrasyon saflığı | Ultraviyole (UV) spektrofotometri | 1-2 |
| Plazmid konformasyonu | Agaroz jel elektroforezi (AGE) |
| Kapiler elektroforez (CE)-isteğe bağlı |
| Plazmid tanımlama | Kısıtlama enzimi tanımlaması/AGE |
Özelliklerimiz
Doğrusallaştırma yöntemlerinin esnek seçimi
- Yüksek Geri Kazanım Oranı
Yüksek geri kazanım oranlarına ulaşmak için DNA ekstraksiyon ve saflaştırma yöntemlerinin optimizasyonu.
Araştırma için %80'in üzerinde plazmit örneklerinin süper sarmal konformasyon oranına sahip sıkı proses kontrol standartları.
Deneysel ihtiyaçları karşılamak için yüksek standartta ve yüksek verimli plazmid hazırlama ve kalite kontrol hizmetleri.
Örnek olay
Yaohai Bio-Pharma'nın ürünü mCherry circRNA'yı örnek olarak alırsak, transkripsiyon şablonu plazmit örneklerinin (araştırma derecesi) aşırı sarmal oranı %70'ten fazladır ve doğrusallaştırma oranı %100'e yakındır.
mCherry circRNA, şablon olarak doğrusallaştırılmış plazmid ile hazırlanır ve 293T hücrelerine transfekte edilir. Yüksek düzeyde floresans ekspresyonu (kırmızı floresans), 24 saatlik transfeksiyondan sonra tespit edilir; bu, 48 saat sonra artacaktır ve transfeksiyondan sonraki 7. günde ve 14. günde hala tespit edilebilir.
mCherry proteini istikrarlı ve verimli bir şekilde eksprese edilir ve transkripsiyonel şablon saflığı, circRNA ilaç ürününün (DP) gereksinimlerini yüksek kalitede karşılayabilir.
mCherry circRNA'nın in vitro ekspresyon doğrulaması
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
YOK HAYIR
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
