Kapsüllemenin temeli dağıtım sisteminin tasarımı ve geliştirilmesidir. İyi tasarlanmış bir dağıtım sistemi, circRNA moleküllerinin RNA enzimleri tarafından parçalanmadan vücuda girmesine ve daha sonra etkili bir şekilde hedef bölgeye iletilmesine, hücre zarını geçmesine ve hücre içi olarak salınmasına olanak tanır.
Lipid nanopartikülleri (LNP'ler), diğer dağıtım sistemlerine kıyasla kapsülleme, in vivo ekspresyon ve in vivo güvenlik avantajlarıyla mevcut en iyi dağıtım sistemidir. Nükleik asit fragmanlarına sahip LNP'ler kolaylıkla hücreler tarafından yutulur ve hücre içi cisimler oluşturur. Hücreye girdikten sonra, hücre içi gövdenin asidik ortamı protonlanır ve iyonize lipidin başını pozitif olarak yükler, böylece hücre içi gövdenin iç zarı ile birleşir ve etki için hedef nükleik asidi hücreye salar.
Yaohai Bio-Pharma circRNA hizmeti gelişmeye devam ediyor ve ilgili kritik süreç parametrelerini optimize etmek ve circRNA ilaç üretiminin tutarlılığını ve tekrarlanabilirliğini geliştirmek için circRNA-LNP kapsülleme hizmeti sağlayabiliyor.
Süreç | Servis Detayları | Teslimat Süresi (Gün) | Teslim |
circRNA-LNP kapsülleme | Malzeme ve sıvı ön işlemi | 2 | circRNA-LNP ilaç ürünü (DP) |
Mikroakışkan cihaz karıştırma | |||
Teğetsel akış filtreleme | 1 | ||
Sterilizasyon filtrasyonu | |||
circRNA-LNP kalite kontrolü | Kapsülleme verimliliği | 1 | Test raporu |
Parçacık boyutu ve Polidispersite indeksi | |||
Zeta potansiyeli |
Hızlı sentez, yüksek Ar-Ge verimliliği ve önceden optimize edilmiş çözümler;
Kapsülleme oranı %90'ın üzerine çıkabilir;
Lipid nanopartiküllerinin boyutu, sıvı enjeksiyon hızı ve oranı değiştirilerek kontrol edilebilir;
circRNA-LNP ürünleri in vitro hücre ekspresyonu ile doğrulanır ve hedef proteini verimli bir şekilde eksprese edebilir.
LNP-eGFP circRNA numuneleri hazırlanır ve bunların farklı dozları (1ug, 2ug ve 4ug), hedef proteini eksprese edip edemediklerini doğrulamak için doğrudan 293T hücrelerine transfekte edilir. 48 saatlik transfeksiyondan sonra net bir floresan sinyali gözlemlenebilir ve floresan yoğunluğunun doz artışı etkisi vardır.
Lipozom ve kapsüllenmemiş eGFP circRNA'dan oluşan Lipo-circ_eGFP, kontrol olarak alınır.