İn vitro siklizasyon ve RNaz R zenginleştirmesi ile elde edilen ürünlerin, siklizasyon reaksiyonunda tüketilmemiş substratlar, reaksiyon yan ürünleri ve çentikli RNA dahil olmak üzere in vitro transkripsiyondan (IVT) daha fazla uzaklaştırılması gerekir.
Yaohai Bio-Pharma, çeşitli safsızlıkları etkili bir şekilde gidermek ve yüksek derecede saf circRNA hazırlamak için olgun LiCl çökeltme, manyetik boncuk saflaştırma, kendi geliştirdiği saflaştırma ve diğer çeşitlendirilmiş saflaştırma çözümlerine sahiptir.
Hücre transfeksiyonu için ve hayvan deneylerinin bir parçası olarak küçük miktarlarda circRNA'ya yönelik saflaştırma çözümü.
Hayvan deneylerinin bir parçası olarak ve hücre transfeksiyonu için küçük miktarlarda circRNA'ya yönelik saflaştırma çözümü.
Daha yüksek kalitede uygulama senaryoları;
GMP üretim gereksinimlerini karşılamak için istikrarlı ve ölçeklenebilir saflaştırma süreci.
Süreç | İsteğe Bağlı Hizmet | Servis Detayları | Teslimat Süresi (Gün) | Teslim |
circRNA saflaştırması | Geleneksel arıtma çözümü | Lityum klorür çökelmesi | 1 | circRNA ilaç maddesi |
Manyetik boncuk saflaştırma | ||||
Son derece saf circRNA saflaştırması | Hazırlayıcı yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) | 1-2 | ||
Tampon değişimi | Ultrafiltrasyon | 1 | ||
circRNA kalite kontrolü | Konsantrasyon / arındırma | Ultraviyole (UV) spektrofotometri | 0.5 | Test raporu |
Saflık | Agaroz jel elektroforezi (AGE)/E-jel | |||
HPLC-isteğe bağlı | 1 |
Uygulama senaryoları elde edilebilir.
saflığı %90'ın üzerinde olan circRNA;
Deney ortamında ve sarf malzemelerinde RNazların sıkı kontrolü sayesinde RNA bozunması etkili bir şekilde önlenir.
Yaohai Bio-Pharma, süreçle ilgili çeşitli safsızlıkları etkili bir şekilde giderebilen olgun bir circRNA saflaştırma çözümü oluşturdu.
Geleneksel çözeltiyle saflaştırılan dairesel RNA ürünleri hala açık bir şekilde çentikli RNA ve intronlarla karıştırılmaktadır.
Yaohai Bio-Pharma tarafından geliştirilen saflaştırma çözeltisinin ardından çentikli RNA ve intronlar gibi çeşitli doğrusal RNA safsızlıkları başarıyla giderilebiliyor.
circRNA İfade Doğrulaması
Geleneksel bir lipozom kullanılarak saflaştırılmış eGFP circRNA, 293T hücrelerine transfekte edilir ve bir floresans sinyali 24 saat sonra gözlemlenir ve 48 saatte geliştirilmeye devam eder. Floresan sinyali hala transfeksiyondan sonraki 7. günde ve 14. günde tespit edilebilmektedir.