Merkezi dogmaya göre haberci RNA (mRNA), genetik materyalin DNA'dan proteinlere aktarılmasında kullanılan köprüdür.
mRNA, proteinleri in vivo olarak kodlayarak biyolojik bir rol oynar ve ökaryotik organizmalardaki olgun mRNA beş bileşenden oluşur: 5' Cap (başlık yapısı), 5' UTR (kodlayıcı olmayan bölge), ORF (açık okuma çerçevesi), 3ʹ UTR ve 3' polyA kuyruğu (poliadenilat kuyruğu).

Hizmet Detayları
Süreç | İsteğe Bağlı Hizmet | Servis Detayları | Teslimat Süresi (Gün) |
mRNA dizisi tasarımı ve optimizasyonu | Kodlama dizilerinin tasarımı ve optimizasyonu | CDS dizisi hizalaması CDS kodon optimizasyonu | 1 |
Kodlamayan dizilerin tasarımı ve optimizasyonu | 5' UTR dizisi tasarımı ve optimizasyonu 3' UTR dizisi tasarımı ve optimizasyonu polyA dizisi tasarımı ve optimizasyonu | 1-2 |
Özelleştirilebilir Seçenekler
5' UTR/3' UTR | - Doğa UTR dizisi
- Mutant/Tasarlanmış UTR dizisi
|
3' PolyA Kuyruk | - 100A ~120A Kuyruk (önerilir)
- Parçalı polyA kuyruğu
- Diğer Özel kuyruk
|
mRNA Dizi Tasarımı için Ortak Stratejiler
mRNA Bileşenleri | Biyolojik Fonksiyonlar | Optimizasyon Stratejileri |
5' Şapka | MRNA'yı ekzonükleazlar tarafından bozulmadan koruyun ve protein translasyonunu başlatmak için 3' ucundaki polyA kuyruğu, polyA bağlayıcı protein ve translasyon başlatma faktörü proteini ile uyum içinde hareket edin. | Doğal Cap1 yapısı, model tanıma reseptörlerini önler ve dolayısıyla, tek adımlı ortak transkripsiyonel kapatma veya iki adımlı enzimatik kapatma ile elde edilebilecek doğal bağışıklık tepkisini azaltır (ayrıntılar için mRNA enzimatik kapatma ve ortak transkripsiyonel kapatmaya bakınız). |
5' UTR | 5' UTR, ribozomlar tarafından tanınabilir, mRNA'nın translasyonunu düzenleyebilir ve mRNA'nın stabilitesini etkileyebilir. | Çok kararlı bir ikincil yapıya sahip olmayan Kozak dizilerini içerir. Yüksek oranda eksprese edilen genlerin doğal UTR'leri, a-globin ve p-globin gibi in vitro transkripsiyon (IVT) mRNA'ları için tercih edilir. |
CDS | Antijenler, antikorlar veya diğer fonksiyonel proteinler için protein kodlayan bölgeler ve kodlama dizileri. | Kodon optimizasyonu, bazı optimal olmayan kodonların protein katlanmasında rol oynayabileceğine dikkat çekerek çeviri düzeyini artırır. |
3' UTR | MRNA çevirisini ve stabilitesini düzenleyin. | Yüksek düzeyde eksprese edilen genlerin doğal UTR'leri, a-globin ve p-globin gibi IVT mRNA'ları için tercih edilir. |
3' poliA kuyruk | Protein ifadesini düzenler ve başlık yapısını bozulmaya karşı korur. | Yeterli uzunluk (100-150 bp) gereklidir; transkripsiyon şablon plazmidindeki polyA kuyruğunun kodlanması, daha tanımlanmış bir polyA kuyruk uzunluğu sağlar. |
Özelliklerimiz
- Çeşitlendirilmiş UTR kaynak seçimi
Yüksek oranda ifade edilmiş doğal ve değiştirilmiş UTR kitaplıklarının birden fazla kaynağı; olgun UTR değişiklik stratejisi;
- Son teknoloji CDS optimizasyon ekibi
Kodonların optimizasyonunu tamamlamak için profesyonel bir AI algoritma ekibiyle işbirliği yapın.
- PolyA kuyruk dağılımı bile
MRNA uzunluğunu daha kesin bir şekilde kontrol etmek için DNA şablonlarına göre polyA dizileri ekleyin.
- Çeşitlendirilmiş optimizasyon kombinasyonları
Düşük immünojenite ile mRNA'nın etkili ekspresyonunu elde edin.
Örnek olay
Çift Raportörlü mRNA'nın Dizi Tasarımı: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharma'nın mRNA hizmeti, ikili genlerin birlikte ekspresyonunu sağlayan çift raportör gen tandem dizisinin tasarımı ve optimizasyonu ile geliştirilmeye devam ediyor.
Geleneksel bir transfeksiyon reaktifi kullanılarak, çift gen tandem sekansı mCherry-eGFP mRNA, 293T hücrelerine transfekte edilir ve mCherry (kırmızı) ve geliştirilmiş yeşil floresan proteinin (eGFP) iki floresan sinyali, 48 saat sonra eşzamanlı ekspresyonla tespit edilir ve istiflenir. grafik sarı renkle vurgulanır.


293T hücresinde mCherry-eGFP mRNA'nın ifadesi