Plazmid DNA, olarak i̇n vitro transkripsiyon (IVT) şablonu, mRNA üretiminde önemli bir ham maddemdir. Plazmid DNA'nın yüksek verimli, yüksek dereceli ve yüksek geri dönüşlü olması plazmid süreç geliştirmede anahtar unsurdur. hedef zaman plazmid süreç geliştirmede karşılaşılan temel zorluklar arasında yer alır.
Yaohai Bio-Pharma, plazmid geliştirme için kapsamlı bir çözüm sunar: yukarı akım (fermentasyon), aşağı akım (temizleme) süreç geliştirmesi, süreç karakterizasyonu ve süreç doğrulaması dahil olmak üzere hizmetler verir. Plazmid verimini artırmak ve karma matrislerden izole etmek için fermentasyon, temizleme ve katıksızlaştırma süreçlerini geliştirmek ve optimize etmek konusunda geniş deneyime sahibiz.
Temel biyoproses plazmid üretimi için şu adımları içerir: Escherichia coli (E. coli) fermentasyonu, hücre toplama ve alkalit lizis, clarification, konsantre etme, üç aşamalı kromatografi süreci (tutma, ara temizleme ve son temizleme), ve konsantre etme.
Hizmet Ayrıntıları | Birim İşlemler | Parametreler |
E. coli fermentasyon |
Sallama Flaskası | Ortam bileşimleri, antibiyotik, bakteriyoçölüm hacmi, büyüme sıcaklığı ve vb. |
Fermentör (7 L) |
Antibiyotik, bakteriyoçölüm hacmi, büyüme sıcaklığı, pH, çözünmüş oksijen (DO), besleme modu (örn., fed-batch), besleme ortamı, fermantasyon süresi ve vb. |
|
Hücre toplama | Mikrofiltrasyon | Standart E. coli toplama işlemi |
Hücre lizisi | Hücre yeniden süspansiyonu, alkalit lizis, nötralizasyon | Alkali oranı, lizis süresi |
Açıklama | Filtrasyon | Ilkel filtreleme, 20 µm ve 5 µm filtre seti (tercih edilen) |
Konsantrasyon | Ultrafiltreleme, teğetsel akış filtrelemesi | Delik boyutu (veya NMWC), Transmembran basıncı (TMP), Akış, filtre hacmi/membran alanı oranı |
Üç adımlı kromatografi | Boyutsal ayırım kromatografisi (SEC) veya jel filtreleme kromatografisi (GFC) | Sütun uzunluğu ve çapı, tampon bileşimi, enjeksiyon hacmi, mobil faz bileşimi (ilave ve desorpsiyon), pH, akış hızı, dengeleme, bağlama, yıkama ve elüsyon koşulları. |
Afinite kromatografisi (AF) | ||
Aniyon değiştirme kromatografisi (AEX) | ||
Konsantrasyon | Ultrafiltreleme, teğetsel akış filtrelemesi | Delik boyutu (veya NMWC), Transmembran basıncı (TMP), Akış, filtre hacmi/membran alanı oranı |
Daha Fazla Biyolojik Temizleme Süreç Çözümleri |