Özel saRNA Sentezi
Kendini çoğaltan mRNA (saRNA), aynı zamanda replikon RNA olarak da bilinir ve in vitro transkripsiyon (IVT) mRNA dizilerini ve alfa veya flavi virüslerden türetilmiş viral replikaz genlerini kodlar. Viral replikaz genleri, mRNA'nın kendini çoğaltmasını sağlar ve bu da non-çoğalan mRNA'lara göre artan protein ifadesine ve minimum gereken RNA dozuna neden olur. Ayrıca, saRNA'nın bir diğer özelliği olan göreceli olarak büyük molekül olmasıdır (14 kb'den fazla).
Yaohai Bio-Pharma, 1000 nt~14000 nt aralığında non-çoğalan mRNA ve kendini çoğaltan mRNA'ları sağlamak için bir dizi mRNA sentezi teknolojisi geliştirmiştir, örneğin dizgi tasarımı ve optimizasyonu, IVT, temizleme, liofilizasyon ve lipid nano parçacık (LNP) kaplama. Tüm ürünler sıkı kalite kontrol standartları altında serbest bırakılır.
Şekil 1. IVT mRNA'larının Yapı Özellikleri: Geleneksel, Dairesel ve Kendini Çoğaltan mRNA.
Kendini Çoğaltan mRNA'nın Dizi Özellikleri
Kendinden artıran RNA, alphavirüslerden türetilen dört yapısal olmayan proteinden (nsP1, nsP2, nsP3 ve nsP4 olarak belirlenmiştir) oluşur, Venezuela at encephalitis virüsü (VEEV). Bunların arasında nsP1 hem GTase hem de N7MTase aktivitelerini sergilerken, nsP2 IVT mRNA'nın kapağını oluşturmak için gerekli olan RTPase aktivitesine sahiptir ve bu da Cap 0 yapısını oluşturur. Ayrıca, nsP2 bir proteaz ve helikaz olarak da işlev görür ve tüm nsP kompleksinin karmaşık işleme adımlarını kolaylaştırır. nsP3'ün tam işlevi hala belirsiz olsa da, çeşitli evcil hücre proteinleriyle etkileşimde bulunarak konak tarafından başlatılan antiviral tepkiyi azaltmaya katkı sağlar.
Bir alphavirus altgenom promotoru (SGP) bölgesi ilgi geni (GOI) öncesinde yer alır. SGP elemanı, virüs nsP proteinlerini kodlayan diziyi okumadan atlayarak GOI transkripsiyonunun başlamasını sağlar.
Şekil 2. Yaohai Bio-Pharma RNASci Platformunda eGFP saRNA sentezi ve hücre deneyleri.
SaRNA'nın Özel Çözümleri
SaRNA'nın sentez protokolü mRNA'ya benzer: Özel mRNA Sentezi
- Dizi Tasarımı
- Plazmid Şablon Hazırlığı
- in vitro transkripsiyon (IVT)
- mRNA Enzimatik Kaplama
- mRNA Ko-transkripsiyon Kaplama
- mRNA Temizleme
- mRNA Liofilizasyonu
- LNP Kapsülleme
- Analiz ve Test
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
