Segundo o dogma central, o RNA mensageiro (mRNA) é a ponte para a transmissão do material genético do DNA para as proteínas.
O mRNA desempenha um papel biológico ao codificar proteínas in vivo, e o mRNA maduro em organismos eucarióticos consiste em cinco componentes: 5' Cap (estrutura cap), 5' UTR (região não codificadora), ORF (quadro de leitura aberto), 3ʹ UTR e cauda 3' poliA (cauda de poliadenilato).
Detalhes dos serviços
| Extração | Serviço Opcional | Detalhes de serviços | Período de entrega (dia) |
| Projeto e otimização de sequência de mRNA | Projeto e otimização de sequências de codificação | Alinhamento de sequência CDS Otimização de códon CDS | 1 |
| Projeto e otimização de sequências não codificantes | Projeto e otimização de sequência UTR de 5' Projeto e otimização de sequência UTR de 3' Projeto e otimização de sequência poliA | 1-2 |
Opções personalizáveis
| 5' UTR/3' UTR | - Sequência UTR da natureza
- Sequência UTR mutante/projetada
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| Cauda PolyA de 3' | - Cauda 100A ~ 120A (recomendado)
- Cauda poliA segmentada
- Outra cauda personalizada
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Estratégias comuns para projeto de sequência de mRNA
| Componentes de mRNA | Funções Biológicas | Estratégias de Otimização |
| boné de 5' | Protege o mRNA da degradação por exonucleases e atua em conjunto com a cauda poliA na extremidade 3', a proteína de ligação poliA e a proteína do fator de iniciação da tradução para iniciar a tradução da proteína. | A estrutura natural de Cap1 evita receptores de reconhecimento de padrões e, portanto, reduz a resposta imune natural, que pode ser alcançada por capeamento co-transcricional de uma etapa ou capeamento enzimático de duas etapas [ver capeamento enzimático de mRNA e capeamento co-transcricional para detalhes]. |
| 5'UTR | A 5'UTR pode ser reconhecida pelos ribossomos, regular a tradução do mRNA e afetar a estabilidade do mRNA. | Contém sequências Kozak sem uma estrutura secundária muito estável. UTRs naturais de genes altamente expressos são preferidos para mRNAs de transcrição in vitro (IVT), como α-globina e β-globina. |
| CDS | Regiões codificadoras de proteínas e sequências codificadoras de antígenos, anticorpos ou outras proteínas funcionais. | A otimização de códons aumenta o nível de tradução, observando que certos códons não ideais podem desempenhar um papel no enovelamento de proteínas. |
| 3'UTR | Regular a tradução e estabilidade do mRNA. | UTRs naturais de genes altamente expressos são preferidos para mRNAs de IVT, como α-globina e β-globina. |
| Cauda poliA de 3' | Regular a expressão de proteínas e proteger a estrutura da tampa da degradação. | É necessário comprimento adequado (100-150 pb); codificar a cauda poliA no plasmídeo modelo de transcrição garante um comprimento de cauda poliA mais definido. |
Nossos recursos
- Seleção diversificada de fonte UTR
Múltiplas fontes de bibliotecas UTR naturais e modificadas altamente expressas; estratégia madura de modificação de UTR;
- Equipe de otimização de CDS de ponta
Coopere com uma equipe profissional de algoritmos de IA para concluir a otimização de códons.
- Distribuição uniforme da cauda poliA
Adicione sequências poliA de acordo com modelos de DNA para controlar o comprimento do mRNA com mais precisão.
- Combinações diversificadas de otimização
Obtenha expressão eficiente de mRNA com baixa imunogenicidade.
Estudo de caso
Projeto de sequência de um mRNA de repórter duplo: mRNA mCherry-eGFP
O serviço de mRNA da Yaohai Bio-Pharma continua a ser atualizado com o projeto e a otimização de uma sequência dupla de genes repórteres, que alcança a coexpressão de genes duplos.
Usando um reagente de transfecção convencional, o mRNA de sequência em tandem de gene duplo mCherry-eGFP é transfectado em células 293T, e dois sinais fluorescentes de mCherry (vermelho) e proteína fluorescente verde melhorada (eGFP) são detectados com expressão simultânea após 48 horas, e o empilhado gráfico é destacado em amarelo.
Expressão de mRNA mCherry-eGFP em células 293T
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