A base do encapsulamento é o design e desenvolvimento do sistema de entrega. Um sistema de entrega bem projetado permite que as moléculas de circRNA entrem no corpo sem serem degradadas pelas enzimas de RNA e, em seguida, sejam efetivamente entregues ao local alvo, atravessem a membrana celular e sejam liberadas intracelularmente.
As nanopartículas lipídicas (LNPs) são o melhor sistema de entrega disponível, com vantagens no encapsulamento, expressão in vivo e segurança in vivo em comparação com outros sistemas de entrega. LNPs com fragmentos de ácido nucleico são facilmente engolidos pelas células e formam corpos intracelulares. Uma vez entrando na célula, o ambiente ácido do corpo intracelular protona e carrega positivamente a cabeça do lipídeo ionizado, fundindo-se assim com a membrana interna do corpo intracelular e liberando o ácido nucleico alvo na célula para ação.
O serviço de circRNA da Yaohai Bio-Pharma continua a melhorar e pode fornecer serviço de encapsulamento de circRNA-LNP para otimizar parâmetros críticos relevantes do processo e melhorar a consistência e reprodutibilidade da produção de medicamentos de circRNA.
Extração | Detalhes de serviços | Período de entrega (dia) | Entregas |
Encapsulamento de circRNA-LNP | Pré-tratamento de materiais e líquidos | 2 | Medicamento circRNA-LNP (DP) |
Mistura de dispositivos microfluídicos | |||
Filtração de fluxo tangencial | 1 | ||
Filtração esterilizante | |||
Controle de qualidade circRNA-LNP | Eficiência de encapsulamento | 1 | Relatório de teste |
Tamanho de partícula e índice de polidispersidade | |||
Potencial Zeta |
Síntese rápida, alta eficiência de P&D e soluções pré-otimizadas;
A taxa de encapsulamento pode chegar a mais de 90%;
O tamanho das nanopartículas lipídicas pode ser controlado alterando a taxa e proporção de injeção de fluido;
Os produtos circRNA-LNP são validados pela expressão celular in vitro e podem expressar a proteína alvo de forma eficiente.
Amostras de circRNA LNP-eGFP são preparadas e as diferentes doses delas (1ug, 2ug e 4ug) são transfectadas diretamente em células 293T para verificar se podem expressar a proteína alvo. Após 48 horas de transfecção, um sinal fluorescente claro pode ser observado e há um efeito de aumento da dose da intensidade da fluorescência.
Lipo-circ_eGFP, composto por lipossoma e circRNA eGFP não encapsulado, é tomado como controle.