Os produtos obtidos por ciclização in vitro e enriquecimento com RNase R requerem remoção adicional da transcrição in vitro (IVT), incluindo substratos não consumidos na reação de ciclização, subprodutos de reação e RNA cortado.
Yaohai Bio-Pharma possui precipitação de LiCl madura, purificação de esferas magnéticas, purificação autodesenvolvida e outras soluções de purificação diversificadas para remover efetivamente várias impurezas e preparar circRNA altamente puro.
Solução de purificação para pequenas quantidades de circRNA para transfecção celular e como parte de experimentos com animais.
Solução de purificação para pequenas quantidades de circRNA para transfecção celular e como parte de experimentos com animais.
Cenários de aplicação com maior qualidade;
Processo de purificação estável e escalonável para atender aos requisitos de produção GMP.
Extração | Serviço Opcional | Detalhes de serviços | Período de entrega (dia) | Entregas |
purificação de circRNA | Solução de purificação convencional | Precipitação de cloreto de lítio | 1 | substância medicamentosa circRNA |
Purificação de contas magnéticas | ||||
Purificação de circRNA altamente puro | Cromatografia líquida preparativa de alta eficiência (HPLC) | 1-2 | ||
Troca de buffer | Ultrafiltração | 1 | ||
circRNAcontrole de qualidade | Concentração/purificação | Espectrofotometria ultravioleta (UV) | 0.5 | Relatório de teste |
Pureza | Eletroforese em gel de agarose (AGE)/E-gel | |||
HPLC opcional | 1 |
Cenários de aplicação podem ser alcançados.
circRNA com pureza superior a 90%;
Através do controle rigoroso das RNases no ambiente experimental e nos consumíveis, a degradação do RNA é efetivamente evitada.
A Yaohai Bio-Pharma estabeleceu uma solução madura de purificação de circRNA que pode remover com eficácia várias impurezas relacionadas ao processo.
Os produtos de RNA circular purificados pela solução convencional ainda estão obviamente misturados com RNA cortado e íntrons.
Após a solução de purificação desenvolvida pela Yaohai Bio-Pharma, várias impurezas lineares de RNA, como RNA cortado e íntrons, podem ser removidas com sucesso.
Validação de Expressão circRNA
Utilizando um lipossoma convencional, o circRNA eGFP purificado é transfectado em células 293T, e um sinal de fluorescência é observado após 24 h e continua a ser aumentado às 48 h. O sinal de fluorescência ainda pode ser detectado no 7º dia e no 14º dia após a transfecção.