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design de Sequência de mRNA

design de Sequência de mRNA

De acordo com o dogma central, o RNA mensageiro (mRNA) é a ponte para a transmissão do material genético do DNA para as proteínas.

o mRNA desempenha um papel biológico codificando proteínas in vivo, e o mRNA maduro em organismos eucarióticos consiste em cinco componentes: 5' Cap (estrutura de cap), 5' UTR (região não codificante), ORF (quadro de leitura aberto), 3' UTR e cauda de poliA de 3'.

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Detalhes dos Serviços
Processo Serviço Opcional Detalhes do Serviço Prazo de Entrega (Dias)
design e Otimização de Sequências de mRNA Design e otimização de sequências codificantes

Alinhamento de sequências CDS

Otimização de codons CDS

1
Design e otimização de sequências não codificantes

design e otimização de sequência de 5' UTR

design e otimização de sequência de 3' UTR

design e otimização de sequência polyA

1-2
Opções personalizáveis
uTR 5'/UTR 3'
  • Sequência UTR Natural
  • Sequência UTR Mutante/Ingenharia
cauda de PoliA 3'
  • cauda de 100A ~120A (recomendada)
  • Cauda poliA segmentada
  • Outra cauda personalizada
Estratégias Comuns para o Design de Sequências de mRNA
componentes de mRNA Funções Biológicas Estratégias de Otimização
5' Cap Proteger o mRNA da degradação por exornucleases e atuar em conjunto com a cauda polyA no extremo 3', proteína de ligação polyA e fator de iniciação de tradução para iniciar a tradução de proteínas. A estrutura natural Cap1 evita receptores de reconhecimento de padrões e, assim, reduz a resposta imunológica natural, que pode ser alcançada por capping co-transcricional em uma etapa ou capping enzimático em duas etapas [veja detalhes sobre capping enzimático de mRNA e capping co-transcricional].
uTR 5' O UTR 5' pode ser reconhecido por ribossomos, regular a tradução do mRNA e afetar a estabilidade do mRNA. Contém sequências Kozak sem uma estrutura secundária muito estável. UTRs naturais de genes altamente expressos são preferidos para transcrição in vitro (IVT) de mRNAs, como α-globina e β-globina.
CDS Regiões codificadoras de proteínas e sequências codificantes para antígenos, anticorpos ou outras proteínas funcionais. A otimização de codons aumenta o nível de tradução, observando que certos codons não ótimos podem desempenhar um papel na dobra da proteína.
3' UTR Regulam a tradução do mRNA e sua estabilidade. UTRs naturais de genes altamente expressos são preferidos para mRNAs de IVT, como α-globina e β-globina.
cauda polyA de 3' Regulam a expressão de proteínas e protegem a estrutura do cap contra degradação. É necessário um comprimento adequado (100-150 pb); codificar a cauda polyA no plasmídeo modelo de transcrição garante um comprimento mais definido da cauda polyA.
Nossos Recursos
  • Seleção diversificada de fontes de UTR

Múltiplas fontes de bibliotecas UTR naturais e modificadas altamente expressivas; estratégia de modificação UTR madura;

  • Equipe de otimização de CDS de vanguarda

Colabore com uma equipe de algoritmos de IA profissional para concluir a otimização dos codons.

  • Distribuição uniforme da cauda polyA

Adicione sequências polyA de acordo com os templates de DNA para controlar o comprimento do mRNA com mais precisão.

  • Combinações de otimização diversificadas

Alcance uma expressão eficiente de mRNA com baixa imunogenicidade.

Estudo de Caso

Design de Sequência de um mRNA de Duplo-relator: mRNA mCereja-eGFP

O serviço de mRNA da Yaohai Bio-Pharma continua sendo atualizado com o design e otimização de uma sequência tandem de duplo gene relator, que alcança a co-expressão de dois genes.

Usando um reagente convencional de transfeção, o mRNA tandem de duplo gene mCereja-eGFP é transfestado em células 293T, e dois sinais fluorescentes de mCereja (vermelho) e proteína fluorescente verde melhorada (eGFP) são detectados com expressão simultânea após 48 horas, e o gráfico empilhado é destacado em amarelo.

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Expressão de mRNA de mCherry-eGFP em célula 293T

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