De acordo com o dogma central, o RNA mensageiro (mRNA) é a ponte para a transmissão do material genético do DNA para as proteínas.
o mRNA desempenha um papel biológico codificando proteínas in vivo, e o mRNA maduro em organismos eucarióticos consiste em cinco componentes: 5' Cap (estrutura de cap), 5' UTR (região não codificante), ORF (quadro de leitura aberto), 3' UTR e cauda de poliA de 3'.
Processo | Serviço Opcional | Detalhes do Serviço | Prazo de Entrega (Dias) |
design e Otimização de Sequências de mRNA | Design e otimização de sequências codificantes |
Alinhamento de sequências CDS Otimização de codons CDS |
1 |
Design e otimização de sequências não codificantes |
design e otimização de sequência de 5' UTR design e otimização de sequência de 3' UTR design e otimização de sequência polyA |
1-2 |
uTR 5'/UTR 3' |
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cauda de PoliA 3' |
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componentes de mRNA | Funções Biológicas | Estratégias de Otimização |
5' Cap | Proteger o mRNA da degradação por exornucleases e atuar em conjunto com a cauda polyA no extremo 3', proteína de ligação polyA e fator de iniciação de tradução para iniciar a tradução de proteínas. | A estrutura natural Cap1 evita receptores de reconhecimento de padrões e, assim, reduz a resposta imunológica natural, que pode ser alcançada por capping co-transcricional em uma etapa ou capping enzimático em duas etapas [veja detalhes sobre capping enzimático de mRNA e capping co-transcricional]. |
uTR 5' | O UTR 5' pode ser reconhecido por ribossomos, regular a tradução do mRNA e afetar a estabilidade do mRNA. | Contém sequências Kozak sem uma estrutura secundária muito estável. UTRs naturais de genes altamente expressos são preferidos para transcrição in vitro (IVT) de mRNAs, como α-globina e β-globina. |
CDS | Regiões codificadoras de proteínas e sequências codificantes para antígenos, anticorpos ou outras proteínas funcionais. | A otimização de codons aumenta o nível de tradução, observando que certos codons não ótimos podem desempenhar um papel na dobra da proteína. |
3' UTR | Regulam a tradução do mRNA e sua estabilidade. | UTRs naturais de genes altamente expressos são preferidos para mRNAs de IVT, como α-globina e β-globina. |
cauda polyA de 3' | Regulam a expressão de proteínas e protegem a estrutura do cap contra degradação. | É necessário um comprimento adequado (100-150 pb); codificar a cauda polyA no plasmídeo modelo de transcrição garante um comprimento mais definido da cauda polyA. |
Múltiplas fontes de bibliotecas UTR naturais e modificadas altamente expressivas; estratégia de modificação UTR madura;
Colabore com uma equipe de algoritmos de IA profissional para concluir a otimização dos codons.
Adicione sequências polyA de acordo com os templates de DNA para controlar o comprimento do mRNA com mais precisão.
Alcance uma expressão eficiente de mRNA com baixa imunogenicidade.
Design de Sequência de um mRNA de Duplo-relator: mRNA mCereja-eGFP
O serviço de mRNA da Yaohai Bio-Pharma continua sendo atualizado com o design e otimização de uma sequência tandem de duplo gene relator, que alcança a co-expressão de dois genes.
Usando um reagente convencional de transfeção, o mRNA tandem de duplo gene mCereja-eGFP é transfestado em células 293T, e dois sinais fluorescentes de mCereja (vermelho) e proteína fluorescente verde melhorada (eGFP) são detectados com expressão simultânea após 48 horas, e o gráfico empilhado é destacado em amarelo.
Expressão de mRNA de mCherry-eGFP em célula 293T