A base da encapsulação é o design e desenvolvimento do sistema de entrega. Um sistema de entrega bem projetado permite que as moléculas de circRNA entrem no corpo sem serem degradadas por enzimas de RNA e depois sejam entregues eficazmente ao local-alvo, cruzem a membrana celular e sejam liberadas intracelularmente.
Partículas lipídicas nanoparticuladas (LNPs) são o melhor sistema de entrega disponível, com vantagens em encapsulamento, expressão in vivo e segurança in vivo em comparação com outros sistemas de entrega. LNPs com fragmentos de ácido nucleico são facilmente engolidos pelas células e formam corpos intracelulares. Ao entrar na célula, o ambiente ácido do corpo intracelular protona e carrega positivamente a cabeça do lipídeo ionizado, fundindo-se assim com a membrana interna do corpo intracelular e liberando o ácido nucleico alvo para agir dentro da célula.
O serviço de circRNA da Yaohai Bio-Pharma continua a se aperfeiçoar e pode fornecer o serviço de encapsulamento de circRNA-LNP para otimizar parâmetros críticos do processo relevante e melhorar a consistência e reprodutibilidade da produção de medicamentos circRNA.
Processo | Detalhes do Serviço | Prazo de Entrega (Dias) | Entregáveis |
Encapsulamento de circRNA-LNP | Pretreamento de Material e Líquido | 2 | produto farmacêutico circRNA-LNP (DP) |
Mistura em Dispositivo Microfluídico | |||
Filtragem por Fluxo Tangencial | 1 | ||
Filtragem esterilizante | |||
controle de qualidade de circRNA-LNP | Eficiência de Encapsulamento | 1 | Relatório de teste |
Tamanho da partícula e índice de polidispersidade | |||
Potencial zeta |
Síntese rápida, alta eficiência em P&D e soluções pré-otimizadas;
A razão de encapsulamento pode chegar a mais de 90%;
O tamanho das nanopartículas lipídicas pode ser controlado alterando a taxa e a proporção de injeção do fluido;
Os produtos circRNA-LNP são validados por expressão celular in vitro e podem expressar a proteína alvo de forma eficiente.
Amostras de LNP-eGFP circRNA são preparadas e diferentes doses delas (1ug, 2ug e 4ug) são transfetadas diretamente em células 293T para verificar se elas podem expressar a proteína alvo. Após 48h de transfecção, é possível observar um sinal fluorescente claro, e há um efeito de escalonamento de dose na intensidade da fluorescência.
Lipo-circ_eGFP, composto por lipossomo e circRNA eGFP não encapsulado, é usado como controle.