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Síntese personalizada de circRNA

Síntese personalizada de circRNA

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RNA IVT

Síntese personalizada de circRNA

O mRNA circular (circRNA) tem sido amplamente utilizado no estudo das funções de genes ou proteínas. Ao mesmo tempo, é popular no desenvolvimento de biológicos preventivos e terapêuticos, semelhante ao mRNA.

A Yaohai Bio-Pharma desenvolveu um conjunto de tecnologias de síntese de circRNA para fornecer RNA de alta qualidade, como design e otimização de sequências, transcrição in vitro (IVT), ciclização, purificação e encapsulamento em nanopartículas lipídicas (LNP). Todos os produtos são liberados sob padrões rigorosos de controle de qualidade (QC).

Aplicações de circRNA

Em comparação com o mRNA linear, o RNA circular (circRNA) é mais estável em estrutura e é um grande ponto quente na pesquisa atual de medicamentos de ácido nucleico. Ele tem uma ampla gama de aplicações em diferentes campos, seja como circRNA codificante ou não codificante, incluindo vacinas preventivas para doenças infecciosas, vacinas oncológicas terapêuticas, medicamentos oncológicos terapêuticos, terapia de reposição de proteínas, medicina regenerativa, terapia celular e genética (CGT), função de esponja molecular e aptâmeros de RNA.

Detalhes do Serviço
Processo Serviço Opcional Detalhes do Serviço Prazo de Entrega (Dias)
design e Otimização de Sequências de circRNA Design e otimização de sequências codificantes Otimização de codons CDS 1
Design e otimização de sequências não codificantes Design e Otimização de Sequências de Introns e Exons, Braços Homólogos e Espaçadores 1-2
Preparação de Plasmídeo Circular Síntese de genes Síntese de Gene (Terceiros) 7 a 10
Amplificação de Plasmídeo Amplificação de Plasmídeo 2
Extração de Plasmídeo
Preparação de Plasmídeo Linearizado Linearização e purificação de plasmídeos Linearização de plasmídeo 1
Purificação de DNA Linearizado
Transcrição in Vitro e Ciclização Transcrição in Vitro e Ciclização Reações de Transcrição in Vitro e Ciclização 1-2
Digestão com RNase R
Otimização-opcional Composição da Reação, Otimização de Tempo 2-5
purificação de circRNA Método Convencional de Purificação Precipitação com cloreto de lítio 1
Purificação com ímãs magnéticos 1
Purificação altamente Pura de circRNA Cromatografia Líquida de Alto Desempenho (HPLC) Preparativa 1-2
Troca de tampão Ultrafiltração 1
liofilização de circRNA Preenchimento de Amostra Enchimento 2-3
Liofilização Pré-congelamento
Secagem primária (sublimação)
Secagem secundária (dessorção)
encapsulamento de circRNA-LNP Encapsulamento em LNP Pretreamento de Material e Líquido 2
Mistura em Dispositivo Microfluídico
Troca de tampão Filtragem por Fluxo Tangencial 1
Estéril Filtração
Controle de Qualidade de DNA de Plasmídeo Concentração/pureza Espectrofotometria Ultravioleta (UV) 1-2
Conformação de plasmídeo Eletroforese em Gel de Agarose (AGE)
Eletroforese Capilar (CE) - Opcional
Identificação de Plasmídeo Identificação de Enzima de Restrição/AGE
Controle de Qualidade de circRNA Concentração/pureza Espectrofotometria Ultravioleta (UV) -
Purificação Eletroforese em Gel de Agarose (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC - Opcional 1
Controle de Qualidade de circRNA-LNP Eficiência de Encapsulamento Método RiboGreen 1
Tamanho de Partícula Difusão Dinâmica da Luz (DLS) 1
Índice de Polidispersidade Difusão Dinâmica da Luz (DLS) 1
Potencial zeta Difusão Dinâmica da Luz (DLS) 1
Ensaio de potência baseado em células Transfecção celular Placa de células, transfecção celular 4
Detecção de proteína alvo Observação por fluorescência, Western Blot/ELISA 1-3
Estudo de Caso

Transfetamos circRNA de proteína fluorescente verde aprimorada (eGFP circRNA), mCereja circRNA, luciferase circRNA em células 293T e detectamos a proteína alvo através de sinais de fluorescência, luminescência ou cor, western blot (WB), ensaio imunoenzimático ligado (ELISA).

Ensaios de Potência Baseados em Células de Amostras circRNA pela Yaohai Bio-Pharma

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