Os produtos obtidos pela ciclização in vitro e enriquecimento com RNase R exigem remoção adicional da transcrição in vitro (IVT), incluindo substratos não consumidos na reação de ciclização, subprodutos da reação e RNA nicked.
A Yaohai Bio-Pharma possui soluções de purificação diversificadas e maduras, como precipitação por LiCl, purificação por ímãs magnéticos e purificação desenvolvida internamente, para remover eficazmente várias impurezas e preparar circRNA de alta pureza.
Solução de purificação para pequenas quantidades de circRNA para transfeção celular e como parte de experimentos em animais.
Solução de purificação para pequenas quantidades de circRNA para transfeção celular e como parte de experimentos em animais.
Cenários de aplicação com qualidade superior;
Processo de purificação estável e escalável para atender aos requisitos de produção GMP.
Processo | Serviço Opcional | Detalhes do Serviço | Prazo de Entrega (Dias) | Entregáveis |
purificação de circRNA | Solução de purificação convencional | Precipitação com cloreto de lítio | 1 | substância ativa de medicamento circRNA |
Purificação com ímãs magnéticos | ||||
Purificação altamente Pura de circRNA | Cromatografia Líquida de Alto Desempenho Preparativa (HPLC) | 1-2 | ||
Troca de tampão | Ultrafiltração | 1 | ||
controle de qualidade circRNA | Concentração/purificação | Espectrofotometria Ultravioleta (UV) | 0.5 | Relatório de teste |
Purificação | Eletroforese em Gel de Agarose (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - Opcional | 1 |
Cenários de aplicação podem ser alcançados.
circRNA com pureza superior a 90%;
Por meio de um controle rigoroso das RNases no ambiente experimental e nos materiais de consumo, a degradação do RNA é eficazmente prevenida.
A Yaohai Bio-Pharma desenvolveu uma solução madura de purificação de circRNA que pode remover eficazmente várias impurezas relacionadas ao processo.
Os produtos de RNA circular purificados pela solução convencional ainda estão obviamente misturados com RNA nicked e íntrons.
Após a aplicação da solução de purificação desenvolvida pela Yaohai Bio-Pharma, várias impurezas de RNA linear, como RNA nicked e íntrons, podem ser removidas com sucesso.
validação da Expressão de circRNA
Usando um lipossoma convencional, o circRNA de eGFP purificado é transfetado em células 293T, e um sinal de fluorescência é observado após 24 horas e continua sendo intensificado após 48 horas. O sinal de fluorescência ainda pode ser detectado no 7º e no 14º dia após a transfecção.