Plazmid: Mała, okrągła cząsteczka DNA o wielkim potencjale

Plazmidy, małe kołowe cząsteczki DNA, służą jako podstawowe wektory do rekombinacji DNA w badaniach biologii molekularnej i terapii genowej. Wynik i jakość plazmidów są kluczowe, przy czym proporcja superpląstowana i zawartość endotoksyn są dwoma istotnymi czynnikami wpływającymi na jakość plazmidów.

Podtypy Plazmidów

Plazmidy wyodrębnione z Escherichia coli (E. coli) występują w różnych podtypach: superpląstowane (SC), otwarte kołowe (OC) oraz liniowe (L) formy (Rysunek 1). Spośród nich, plazmidy superpląstowane charakteryzują się doskonałą stabilnością, antigenicznością oraz wysoką efektywnością transfekcji i ekspresji.

Rysunek 1. Schematyczny Diagram Powszechnych Podtypów Plazmidów

W elektroforezie DNA plazmidowego w żelu agarowym kolejność prędkości migracji to DNA superpląstowane, DNA liniowe i DNA otwarte kołowe (Rysunek 2).

Rysunek 2. Wzorzec Migracji Elektroforezy w Żelu Agarowym Różnych Podtypów Plazmidów

Yaohai Bio-Pharma nieustannie doskonaliło swoje procesy i techniki, aby zapewnić, że proporcja supercoilowa plazmidów transfekcyjnych wynosi ≥85%, a plazmidów badawczych ≥50%. Poniżej przedstawiono demonstrację przypadku (rysunek 3), gdzie elektroforeza w gelu agarowym jest kombinowana z oprogramowaniem Gel-Pro Analyzer do wykrywania proporcji supercoilowej.

Rysunek 3. Wyniki kontroli jakości proporcji supercoilowej plazmidów

Endotoksyna

Endotoksyna, składnik ściany komórkowej bakterii Gram-ujemnych, składa się przede wszystkim z lipopolisacharydu A (LPS-A) jako swojego toksycznego składnika. Podczas ekstrakcji plazmidów endotoksyna uwalnia się do roztworu lizatu, co poważnie wpływa na efektywność transfekcji plazmidów do komórek. Ponadto może aktywować niespecyficzne odpowiedzi immunologiczne w komórkach, prowadząc do fałszywie pozytywnych wyników eksperymentów.

Yaohai Bio-Pharma przyjmuje podejście „bez wprowadzania” i „wysokiego usuwania”, ściśle kontrolując użycie reagentów i materiałów zawierających endotoksyny w całym procesie oczyszczania. Firma opracowała również wydajną metodę usuwania endotoksyn, oferując trzy poziomy zawartości endotoksyn: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg oraz ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma dysponuje linią usług wysokoprzepustowego wyciągania plazmidów, zdolną dostarczyć 1 mg wyciągniętych plazmidów w ciągu jednego tygodnia. Domyślnie wykonuje ponad siedem testów kontroli jakości (QC), aby zapewnić dostarczanie plazmidów najwyższej jakości i standardu z różnych perspektyw.

Szukamy również globalnych partnerów instytucjonalnych lub indywidualnych. Ofiarowujemy najbardziej konkurencyjne wynagrodzenie w branży. Jeśli masz jakiekolwiek pytania, prosimy o kontakt: [email protected]