Szablony plazmidów mRNA: kluczowe elementy i strategie projektowania

Tworzenie mRNA dla szczepionek lub terapii zaczyna się od dobrze zaprojektowanego szablonu plazmidu. Oto krótki przewodnik po kluczowych elementach i sposobie ich optymalizacji pod kątem sukcesu.

Promotor: Gdzie zaczyna się transkrypcja

Promotor T7 jest najpopularniejszym wyborem do rozpoczęcia syntezy mRNA. Jego klasyczna sekwencja, „TAATACGACTCACTATAGGG”, zapewnia wydajną transkrypcję. Z czasem naukowcy opracowali odmiany, takie jak szablony GG, AG i AT/AU, aby współpracować z zaawansowanymi systemami cappingowymi, takimi jak CleanCap lub samowzmacniające się platformy RNA.

Liniowość: Cięcie plazmidu w celu uzyskania precyzji

Aby powstrzymać plazmid przed niekończącą się transkrypcją, należy go przeciąć w określonym miejscu. Enzymy typu IIS, takie jak BspQⅠ lub BsaⅠ, są idealne do tego zadania. Przecinają DNA poza sekwencją rozpoznawania, nie pozostawiając żadnych dodatkowych bitów i zachowując kluczowy ogon polyA.

Plan mRNA: podstawowe elementy sukcesu

Sekwencja mRNA obejmuje czapeczkę 5', nieprzetłumaczone regiony (UTR), sekwencję kodującą (CDS) i ogon polyA. Oto jak zaprojektowano każdą część:

• UTR-y:Można je zapożyczyć z naturalnych genów o dużej ekspresji (np. genów wirusów) lub zaprojektować je specjalnie przy użyciu zaawansowanych algorytmów w celu uzyskania lepszej wydajności.
• CDS:Naukowcy najpierw projektują sekwencję białka, a następnie optymalizują kod DNA w celu zapewnienia wydajnej ekspresji.
• Ogon PolyA:Odcinek składający się z 100–120 adenin lub wersja segmentowana, taka jak 30A + Linker + 70A, zapewnia stabilność i funkcjonalność mRNA.

Opanowując te elementy, naukowcy mogą tworzyć potężne szablony mRNA dla wszystkiego, od szczepionek po najnowocześniejsze terapie. Przyszłość medycyny zaczyna się tutaj!

Yaohai Bio-Pharma to platforma przedsiębiorstwa specjalizująca się w usługach dla systemów ekspresji mikrobiologicznej. Opierając się na dziesięcioletnim doświadczeniu, Yaohai opracowało kompleksowy zestaw technologii zgodnych z GMP do syntezy liniowego i kolistego mRNA, oferując wysokiej jakości produkty RNA, które obejmują projektowanie i optymalizację sekwencji, syntezę genów, transkrypcję in vitro (IVT), cyrkularizację, oczyszczanie RNA i enkapsulację LNP.

Aktywnie poszukujemy także partnerów instytucjonalnych lub indywidualnych na całym świecie. Oferujemy najbardziej konkurencyjne wynagrodzenie w branży. Jeśli masz jakiekolwiek pytania, skontaktuj się z nami: [email protected]