Zbadaj czystość RNA: chromatografia jonowymienna

Chromatografia jonowymienna skutecznie oczyszcza RNA poprzez rozdzielenie cząsteczek o różnych ładunkach. W zależności od stanu protonacji przy różnych poziomach pH, ​​cząsteczki RNA mogą przenosić ładunki dodatnie lub ujemne. Ta właściwość jest wykorzystywana w chromatografii jonowymiennej do kontrolowania oddziaływań między RNA a fazą stacjonarną poprzez dostosowanie siły jonowej i pH roztworu, co pozwala na uzyskanie separacji.

Jako pierwszy i największy CRDMO zajmujący się mikrobiologicznymi produktami biologicznymi w Chinach, Yaohai Bio-Pharma oferuje kompleksowe rozwiązania dostosowane do potrzeb klienta lub samodzielne usługi obejmujące syntezę RNA, inżynierię i konstrukcję szczepów, rozwój procesów w górę i w dół łańcucha dostaw, produkcję substancji leczniczych na poziomie GMP lub nie-GMP, a także usługi napełniania i wykańczania dla różnych modalności, takich jak mRNA, circRNA, RNA plazmidowe, białka rekombinowane, peptydy, enzymy, przeciwciała jednodomenowe i VLP do użytku u ludzi i zwierząt.

Przyjrzyjmy się bliżej zastosowaniom chromatografii jonowymiennej w konkretnych procesach oczyszczania.

1. Przygotowanie próbki: Rozpuść złożoną mieszaninę zawierającą docelowe biocząsteczki w odpowiednim roztworze buforowym. Wybór pH może wpłynąć na stan naładowania biocząsteczek, wpływając tym samym na wydajność separacji.

2. Wybór kolumny: Wybierz odpowiedni typ kolumny jonowymiennej na podstawie charakterystyki ładunku cząsteczek docelowych. Typowe materiały kolumn obejmują żywice kationowymienne i żywice anionowymienne, w zależności od ładunku cząsteczek docelowych.

3. Ładowanie próbki: Przepuść przygotowany roztwór próbki przez kolumnę chromatograficzną. Grupy funkcyjne na żywicy jonowymiennej oddziałują z naładowanymi jonami w próbce, co skutkuje różnymi czasami retencji dla cząsteczek o różnych właściwościach ładunku.

4. Proces elucji: Użyj roztworów buforowych elucji ze stopniowo wzrastającą siłą jonową lub zmienionym pH, aby wyeluować docelowe biocząsteczki z kolumny. Te warunki elucji stopniowo modyfikują interakcję między biocząsteczkami a żywicami jonowymiennymi, osiągając oczyszczenie docelowych cząsteczek.

5. Zbieranie oczyszczonych cząsteczek docelowych: Zbieranie i analiza oczyszczonych frakcji docelowych cząsteczek biologicznych w oparciu o ich charakterystykę adsorpcji i sekwencję elucji.

6. Postprodukcja: Wykonaj niezbędne kroki postprodukcji na zebranych cząsteczkach docelowych, takie jak zagęszczanie, rozpuszczanie, rekrystalizacja itp., aby uzyskać produkt końcowy o wysokiej czystości i aktywności.

Chromatografia jonowymienna jest cennym narzędziem w przemyśle biofarmaceutycznym i biochemicznym ze względu na możliwość skutecznego oczyszczania biocząsteczek, takich jak białka, kwasy nukleinowe i peptydy, co pozwala na uzyskanie produktów o wysokiej czystości, niezbędnych do badań, diagnostyki i zastosowań terapeutycznych.

Yaohai Bio-Pharma aktywnie poszukuje również instytucjonalnych lub indywidualnych partnerów globalnych i oferuje najbardziej konkurencyjne wynagrodzenie w branży. Jeśli masz jakiekolwiek pytania, skontaktuj się z nami: [email protected]