Badaj czystość RNA: chromatografia wymiany jonowej

Chromatografia wymiany jonowej skutecznie czysti RNA, oddzielając cząsteczki o różnych ładunkach. W zależności od ich stanu protonacji na różnych poziomach pH, cząsteczki RNA mogą nosić ładunki dodatnie lub ujemne. Ta właściwość jest wykorzystywana w chromatografii wymiany jonowej do kontrolowania interakcji między RNA a fazą stacjonarną poprzez dostosowanie siły jonowej i pH roztworu, co umożliwia separację.

Jako pierwsze i największe CRDMO mikrobiologiczne w Wielkiej Chinie, Yaohai Bio-Pharma oferuje kompleksowe, dostosowane rozwiązania lub niezależne usługi, od syntezy RNA, inżynierii i konstrukcji szczepów, opracowywania procesów górnego i dolnego strumienia, po produkcję substancji czynnych na poziomie GMP lub nie-GMP oraz usługi wypełniania dla różnych modalności, takich jak mRNA, circRNA, plazmidowe RNA, rekombinujące białka, peptydy, enzymy, pojedyncze domeny antyciała oraz VLPs do użytku u ludzi i zwierząt.

Wyobraźmy sobie zastosowania, jakie chromatografia wymiany jonów oferuje dla konkretnych procesów oczyszczania.

1. Przygotowanie próbki: Rozpuszcz złożony mieszanek zawierający celowe biomolekuły w odpowiednim roztworze buforującym. Wybór pH może wpływać na stan ładunkowy biomolekuł, co z kolei wpływa na wydajność oddzielenia.

2. Wybór kolumny: Wybierz odpowiedni typ kolumny do wymiany jonowej na podstawie cech ładunkowych cząsteczek docelowych. Powszechne materiały kolumny obejmują żywice do wymiany kationów i anionów, w zależności od ładunku cząsteczek docelowych.

3. Wprowadzanie próbki: Przepuść przygotowany roztwór próbkę przez kolumnę chromatograficzną. Funkcyjne grupy na żywicy do wymiany jonów oddziałują z naładowanymi jonami w próbie, co prowadzi do różnych czasów zatrzymywania się dla cząsteczek o różnych właściwościach ładunkowych.

4. Proces elucji: Użyj roztworów buforowych do elucji z kolumny docelowych biomolekuł, stopniowo zwiększając siłę jonową lub zmieniając pH. Te warunki elucyjne stopniowo modyfikują interakcje między biomolekułami a żywicami jonowymi, osiągając oczyszczenie docelowych molekuł.

5. Zbieranie oczyszczonych biomolekuł: Zbierz i przeanalizuj oczyszczone frakcje docelowych biomolekuł na podstawie ich cech adsorpcyjnych i kolejności elucji.

6. Poobsługa: Wykonaj niezbędne kroki poobsługi na zebranych biomolekułach, takie jak koncentracja, rozpuszczanie, rekryształtyzacja itp., aby uzyskać produkt końcowy o wysokiej czystości i aktywności.

Chromatografia jonowa jest cenna w biotechnologii farmaceutycznej i biochemicznej dzięki swojej zdolności efektywnego oczyszczania biomolekuł, takich jak białka, kwas nukleinowy i peptydy, dostarczając produktów o wysokiej czystości niezbędnych dla badań, diagnostyki i zastosowań leczniczych.

Yaohai Bio-Pharma aktywnie poszukuje globalnych partnerów instytucjonalnych lub indywidualnych i oferuje najbardziej konkurencyjne wynagrodzenie w branży. Jeśli masz jakiekolwiek pytania, prosimy o kontakt: [email protected]