Wszystkie kategorie
Artykuł

Odkryj Fascynujący Świat Czystki Chloreku Litu

Oct 28, 2024

Precypitacja chlorowym litu jest powszechnie stosowana do oddzielenia RNA od roztworu.

Oto podział procesu:

1. Przygotowanie próby: Zacznij od próbki zawierającej RNA, takiej jak in vitro mieszanka transkryptów.

2. Dodawanie chlorowatego litu: Dodaj odpowiednią ilość skoncentrowanego roztworu chlorowatu litu do roztworu RNA.

3. Inkubacja: Po dodaniu chlorowatku litu, roztwór jest inkubowany przy niskiej temperaturze, zazwyczaj około -20°C. To spowoduje, że cząsteczki RNA wykrystalizują się z roztworu.

4. Centrifugacja: Po inkubacji, roztwór jest centrifugowany z dużą prędkością. To rozdziela zprecypitowane RNA od reszty roztworu, który zawiera nieczystości.

5. Płukanie: Gdy centrifugacja zostanie zakończona, ostrożnie usuń nadfazę, nie ingerując w precypitację RNA. Płuć cząsteczki RNA zimnym etanolem lub izopropylowym alkoholem, aby usunąć wszelkie pozostałe nieczystości.

6. Ponowne rozpuszczenie RNA: Po myciu, osad RNA jest krótko suszony w powietrzu, a następnie ponownie rozpuszczany w odpowiednim buforze, takim jak bufor TE (bufor Tris-EDTA) lub wodzie destylowanej. Delikatne pipetowanie lub prądy wirujące mogą być konieczne, aby odpowiednio ponownie rozpuścić RNA.

7. Kwantyfikacja i analiza: Na końcu, izolowane RNA jest kwantyfikowane za pomocą spektroskopii ultrafiołowej lub metody fluorescencyjnej. To określa stężenie i czystość próbki RNA, co jest ważne dla zastosowań w dalszym ciągu, takich jak enkapsulacja LNP i transfekcja komórkowa.

Yaohai Bio-Pharma posiada umiejętności w stosowaniu metody osadnienia chlorkiem litu w procesie produkcyjnym, ponieważ jest ona prosta, tania i produkuje wysokiej jakości RNA odpowiednie dla różnych zastosowań w biologii molekularnej. Jednakże ważne jest optymalizacja warunków (np., stężenie chlorku litu, czas inkubacji, prędkość odśrodkowywania), aby uzyskać najlepsze wyniki dla konkretnej próbki.

Opierając się na naszej potężnej i własnej platformie RNASci, oferujemy również usługi niestandardowego syntezowania RNA, w tym mRNA (do 10 kb), circRNA (do 4 kb) oraz produkty katalogowe LNP. Ustanowiliśmy kompleksowy zestaw technologii syntetycznych mRNA/circRNA, aby dostarczać wysokiej jakości RNA, takie jak projektowanie i optymalizacja sekwencji, IVT, cyrkularyzacja, czyszczenie oraz enkapsulacja LNP. Wszystkie produkty są wydawane zgodnie ze ścisłymi standardami kontroli jakości.

Yaohai Bio-Pharma jest pierwszym i największym CRDMO biologicznym specjalizującym się w systemach ekspresji mikrobiologicznych w Wielkim Chiny. Ofiarowujemy kompleksowe, dostosowane rozwiązania jednoetapowe lub usługi autonomiczne, od syntezy RNA, inżynierii i konstrukcji szczepów, opracowania procesów górnego i dolnego strumienia, po produkcję substancji czynnej na poziomie GMP lub nie-GMP oraz usługi wypełniania dla różnych modalności, takich jak mRNA, circRNA, plazmid RNA, białka rekombinacyjne, peptydy, enzymy, pojedyncze domeny antyciała (sdAbs) i VLPs. Zajmujemy się spełnianiem potrzeb klinicznych i komercyjnych globalnych klientów w zakresie leków biologicznych, szczepionek i diagnostyki zarówno dla użytku ludzkiego, jak i weterynaryjnego.

Yaohai Bio-Pharma aktywnie poszukuje globalnych partnerów instytucjonalnych lub indywidualnych i oferuje najbardziej konkurencyjne wynagrodzenia w branży. Jeśli masz jakiekolwiek pytania, prosimy o kontakt: [email protected]