mRNS tiek sintezēta ar in vitro transkripciju (IVT) no linearizētas plazmīdas DNS (pDNS). IVT procedūras laikā veidojas arī daži blakusprodukti, tostarp divpavedienu RNS (dsRNS), kas identificēti kā galvenie iedzimtā imūnceļa izraisītāji. Ir ļoti svarīgi noņemt piemaisījumus un iegūt augstu ražu tīra mRNS in vitro/vivo mRNS pētniecībai un terapeitiskiem lietojumiem.
Yaohai Bio-Pharma ir izveidojis mRNS sintēzes tehnoloģiju kopumu, lai nodrošinātu ļoti tīra mRNS, piemēram, secību projektēšana un optimizācija, IVT, attīrīšana, liofilizācija un lipīdu nanodaļiņu (LNP) iekapsulēšana. Visi produkti tiek izlaisti saskaņā ar stingriem kvalitātes kontroles standartiem. Afinitātes hromatogrāfija (AC), kuras pamatā ir spēcīga un selektīva mijiedarbība starp mRNS 3′ poliA asti ar stacionārās fāzes oligo dT, ir efektīva un mērogojama mRNS attīrīšanas stratēģija.
Piegādes
| Produkts |
Pielāgota ļoti tīra mRNS
|
| Garums |
100-10,000 XNUMX nukleotīdu |
| RNS saturs |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Tīrība |
A260 / A280 |
| Identificēt un tīrība |
Agarozes gēla elektroforēze (AGE)
Kapilārā elektroforēze (CE)
|
| Buferis |
RNāzes nesaturošs ūdens (šķidrums) |
| Piegāde |
Kuģis ar sauso ledu; vai zem apkārtējās vides temperatūras |
| glabāšana |
● Šķidrums, -20°C vai zemāk
● Liofilizēts pulveris, 4°C
|
| iesniegums |
LNP formulējuma izstrāde,
Uz šūnām balstīti testi, eksperimenti ar dzīvniekiem
|
Citas pielāgojamas opcijas
| 5' Cap |
● Bez vāciņa
● Cap0, co-capped
● Cap1, co-capped
● Cap1, enzīmu ierobežošana
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Dabas UTR secība
● Mutants/inženierizēta UTR secība
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A aste (ieteicams)
● Segmentēta poliA aste
● Cita pielāgota aste
|
| Modificēti nukleozīdi |
● Nemodificētas bāzes,
● pseidouridīns (Ψ),
● N1-metilpseudouridīns (N1Ψ),
● 5-metilcitozīns (m5C),
● 5-metiluridīns (m5U),
● 5-metoksiuridīns (5 moU),
● 2-tiouridīns (s2U),
● 2′-O-metil-U
● pārējie
|
Gadījuma izpēte
Mēs izstrādājām daudzpakāpju hromatogrāfijas attīrīšanas procesu un sagatavojām mRNS ar augstu tīrību un integritāti (> 95%).
Attēls. Augstas tīrības (＞98%) mRNS analīze
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
