In vitro transkripcijos (IVT) mRNR paruošimo procese reikalinga tiesinė plazmidinė DNR kaip IVT transkripcijos šablonas, naudojant T7 RNR polimerazę. Aukštos kokybės plazmidinė DNR yra labai svarbi transkripcijai in vitro.
Remdamasi brandžios plazmidės paruošimo paslaugų platforma, Yaohai Bio-Pharma gali pasiūlyti aukšto grynumo ir aukšto lygio tiesinę plazmidės DNR paruošimo paslaugą, kad būtų pasiekta efektyvi IVT transkripcija.
Paslaugų informacija
| Procesas | Pasirenkama paslauga | Informacija apie paslaugą | Pristatymo laikotarpis (darbo diena) |
| Žiedinės plazmidės paruošimas | Genų sintezė | Genų sintezė (trečioji šalis) | 7-10 |
| Plazmidės stiprinimas | Plazmidės stiprinimas | 2 |
| Plazmidės ekstrahavimas |
| Linearizuotos plazmidės paruošimas | Plazmidžių tiesinimas ir gryninimas | Plazmidžių linijavimas | 1 |
| Linijinis DNR valymas |
| Plazmidinės DNR kokybės kontrolė | Koncentracijos grynumas | Ultravioletinė (UV) spektrofotometrija | 1-2 |
| Plazmidės konformacija | Agarozės gelio elektroforezė (AGE) |
| Kapiliarinė elektroforezė (CE) – neprivaloma |
| Atpažinti plazmidę | Restrikcijos fermento identifikavimas/ AGE |
Mūsų funkcijos
Lankstus linearizacijos metodų pasirinkimas
- Aukštas atkūrimo rodiklis
DNR ekstrahavimo ir gryninimo metodų optimizavimas, kad būtų pasiektas didelis atkūrimo rodiklis.
Griežti proceso kontrolės standartai, kurių plazmidžių mėginių superspiralinės konformacijos greitis tyrimams viršija 80%.
- Brandžios platformos procesas
Aukšto lygio ir didelio efektyvumo plazmidžių paruošimo ir kokybės kontrolės paslaugos, atitinkančios eksperimentinius poreikius.
Atvejo analizė
Pavyzdžiui, Yaohai Bio-Pharma kataloge esantis mRNA_luciferazės produktas, transkripcijos šablono plazmidės mėginio (tyrimo laipsnio) superspiralinis santykis yra didesnis nei 90%, tiesiškumo santykis yra beveik 100%, o vėlesnis transkripcijos santykis yra iki 1:200 ( linearizuota plazmidinė DNR:mRNR).
mRNR_luciferazė, gauta paruošus tiesinę plazmidę kaip šabloną, yra transfekuojama į 293T ląsteles, o fermento ir substrato reakcijos aktyvumas įvertinamas praėjus 24 valandoms po transfekcijos.
Galima aptikti akivaizdų stiprų liuciferazės aktyvumo signalą, ty luciferazės baltymas ekspresuojamas efektyviai, o tai rodo, kad transkripcijos šablono grynumas gali visiškai patenkinti aukštos kokybės mRNR paruošimo poreikį.
Superspiralinės plazmidės santykio tyrimas
Liuciferazės mRNR ekspresijos patvirtinimas in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
