Yaohai Bio-Pharma paruošia cirRNR, pagrįstą PIE sistema (egzonų ir intronų derinimas), kuri remiasi I tipo intronų savaiminio susijungimo funkcija, kad būtų pasiekta RNR ciklizacija. PIE struktūra sukurta naudojant T4 td geną arba žuvies tRNR pirmtako geną, o išdėstymas yra toks:
RNR intronas ir pagalbinis egzono fragmentas yra padalinti į dvi dalis (5' galą ir 3' galą), kur 5' galinė seka perkeliama į tikslinės sekos uodegą, o 3' galinė seka įterpiama į priekinę tikslinė seka, o tikslinė geno seka įterpiama viduryje.
Katalizuojant GTP, PIE struktūra lemia kitų nei intronų sekų ciklizavimą. Kartu su pagrįsta ciklizacijos greičio didinimo strategija, Yaohai Bio-Pharma gali pasiekti iki 4 kb sekų ciklizaciją, kai ciklizacijos greitis yra didesnis nei 80%.
1 pav. CirRNR cirkuliacija in vitro, pagrįsta PIE sistema
Paslaugų informacija
| Procesas | Pasirenkama paslauga | Informacija apie paslaugą | Pristatymo laikotarpis (darbo diena) |
| cirRNR sekos projektavimas ir optimizavimas | Kodavimo sekų projektavimas ir optimizavimas | CDS sekos derinimas CDS kodono optimizavimas | 1 |
| Nekoduojančių sekų projektavimas ir optimizavimas | Intronų ir egzonų sekos projektavimas ir optimizavimas Homologinės rankos sekos projektavimas ir optimizavimas Tarpinių sekos projektavimas ir optimizavimas | 1-2 |
Bendros mRNR sekos projektavimo strategijos
| CircRNA komponentai | Biologinės funkcijos | Optimizavimo strategijos |
| Dviejų galų intronų ir egzonų sekos | GTP katalizuojamas intronų savaiminis susijungimas sekų ciklizavimui už introno ribų. | Sukurta pagal T4 td geną arba žuvų taukų tRNR pirmtakų geną. |
| Kodavimas | IRES | Vidinė ribosomų atpažinimo vieta, reguliuojanti cirRNR transliaciją. | Vidinių ribosomų įėjimo vietos (IRES) sekų iš skirtingų virusų šaltinių, pvz., EMCV, CVB3 šaltinių, atranka. |
| CDS | Baltymus koduojančios sritys, sekos, koduojančios antigenus, antikūnus ar kitus funkcinius baltymus. | Kodono optimizavimas padidina vertimo lygį; tam tikri neoptimalūs kodonai gali turėti įtakos baltymų lankstymuisi. |
| Nekodavimas | Nekoduojančios sekos | Nukreipkite į miRNR arba baltymus, kad galėtumėte reguliuoti geną arba baltymą. | Nukreipimas į specifines miRNR ar baltymų surišimo vietas gali pakartoti surišimo vietos sekas. |
Mūsų funkcijos
- Optimizuota PIE ciklizacijos sistema Derinys su pagrįstomis optimizavimo strategijomis, kad būtų pasiektas didesnis nei 80 % ciklizacijos koeficientas;
- Pažangiausia CDS optimizavimo komanda Bendradarbiavimas su profesionalia AI algoritmų komanda siekiant užbaigti CDS regiono kodonų optimizavimą;
- Brandaus ir tobulo proceso cirRNR gali būti pasiektas su dideliu ciklizacijos efektyvumu, dideliu stabilumu ir dideliu vertimo efektyvumu.
Atvejo analizė
Yaohai Bio-Pharma pristatė kontrolinį produktą, patobulintą žalią fluorescencinį baltymą (eGFP) cirRNR, kuris yra pagrįstas PIE sistema, kad būtų pasiektas RNR ciklizavimas.
Naudojant įprastą transfekcijos reagentą, eGFP cirRNR yra transfekuojama į 293T ląsteles, o eGFP (žalias) fluorescencinis signalas gali būti aptiktas po 24 val., kuris bus sustiprintas po 48 val. Fluorescencinis signalas vis dar gali būti aptiktas 7 dieną ir 14 dieną po to. transfekcija.
eGFP cirkRNR ekspresijos patvirtinimas in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
