In vitro transkripcijos (IVT) mRNA paruošimo procese kaip transkripcijos šablonui naudojama tiesinė plazmidų DNA su T7 RNA polimeraze. Aukštos kokybės plazmidų DNA yra būtina in vitro transkripcijai.
Remiantis pažangia plazmidų paruošimo platforma, Yaohai Bio-Pharma gali teikti aukštos rūšies ir standartizacijos tiesinių plazmidų DNA paruošimo paslaugas, siekiant efektyvaus IVT transkripcijos proceso.
Paslaugų detalės
| Procesas |
Neprivalomas Paslauga |
Paslaugų detalės |
Pristatymo Laikotarpis (darbo diena) |
| Ciklinio plazmido paruošimas |
Geno sintezė |
Genų sintezė (Trečiosios šalies) |
7-10 |
| Plazmido pagarsinimas |
Plazmido pagarsinimas |
2 |
| Plazmido ištraukimas |
| Linijinio plazmido paruošimas |
Plazmidinio linearizavimas ir purifikavimas |
Plazmido linijinimas |
1 |
| DNA linijinimo šalinimas |
| Plazmidinės DNA kokybės kontrolė |
Konscentracijos švarumas |
Ultravioletinė (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmido konformacija |
Agaroidinio Gelo Elektroforezė (AGE) |
| Kapilinė elektroforezė (CE)-pasirinktinai |
| Plazmido identifikavimas |
Ribonukleaza identifikavimas / AGE |
Mūsų ypatybės
- Nemokamas kirtinamas plazmidinis šablonas
Linerizacijos metodu lankstus pasirinkimas
- Aukštas atgavimo rodiklis
Optimizavimas DNS ištraukimo ir taisyklinimo metodams, siekiant aukštių grąžos rodiklių.
- Griežtas kokybės kontrolė
Griežtos procesų kontrolės standartai, su plazmidinių imčių superhelikalios konformacijos norma tyrimams daugiau nei 80%.
- Išsiskirianti Platforma Procesas
Aukštojo standarto ir efektyvūs plazmidinių nusparčių parengimo bei kokybės kontrolės paslaugos, atitinkančios eksperimentinius poreikius.
Praktinis pavyzdys
Imant kaip pavyzdį Yaohai Bio-Pharma katalogo mRNA_luciferase produktą, transkripcijos šablonas – plazmidinė preparata (mokslinių tyrimų lygis) turi daugiau nei 90% superplizėjimo santykį, lineariacijos santykį beveik 100%, o vėlesnis transkripcijos santykis siekia iki 1:200 (lineariuotasis plazmidinis DNA:mRNA).
Per lineariuotą plazmidą kaip šabloną gauta mRNA_luciferase yra įtempiama į 293T ląstelę, o enzimo-priedo reakcijos aktyvumas įvertinamas po 24 valandas nuo įtempimo.
Galima nustatyti aiškiai stiprią luciferazės aktyvumo signalą, tai reiškia, kad luciferazės proteinas efektyviai išsiskiria, rodanči, kad transkripcijos šablono garsumas pilnai tenkina aukštos kokybės mRNA paruošimo reikalavimus.
Superplizėjimo plazmidų santykio tyrimas
Luciferazės mRNA išraiškos in vitro patvirtinimas
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
