Plazmidinė DNA, kaip in vitro transkripcijos (IVT) šablonas, yra svarbus sukilimo medžiaga mRNA gamybai. Aukštas plazmidinės DNA gamybos apimtis, aukšta jai purečio ir aukštas atgauginimo lygis yra pagrindiniai tikslas dalykai plazmidų procesų kūrimo metu.
Yaohai Bio-Pharma siūlo visapusišką sprendimą plazmidų kūrimui, įskaitant viršutinę (fermentaciją), apatinę (purifikaciją) procesų kūrimą, procesų charakteristiką ir validaciją. Mes turime plačią patirtį plazmidų gamybos apimties pagerinimo srityje ir jų išskyrimo iš sudėtingų junginių, kurią galima pasiekti sukurdami ir optimizuodami fermentacijos, purifikacijos ir dalelės pašalinimo procesus.
Pagrindinis biologinis procesas plazmidų gamybai apima: Escherichia coli (E. coli) fermentaciją, ląstelių surinkimą ir alkaulinę liksimą, aiškinimą, koncentraciją, tris etapus chromatografijos proceso (fiksuojamojo, tarpinio purifikavimo ir galutinio polirovimo), bei koncentraciją.
Paslaugų detalės | Jedinių operacijų | Parametrai |
E. coli fermentavimas |
Sumaičio butelis | Vidurinės sudėtys, antibiotikas, inkubacijos apimtis, augimo temperatūra ir t.t. |
Fermentatorius (7 L) |
Antibiotikas, inkubacijos apimtis, augimo temperatūra, pH, išspręstasis deguonis (DO), priežiūros būdas (pavyzdžiui, daugiametė), priežiūros viduriniai, fermentacijos laikas ir t.t. |
|
Ląstelių gavimas | Mikrofiltracija | Standartas E. coli gavimo procesas |
Ląstelių lyzė | Ląstelės atnaujinimas, alkaulinis lizavimas, neutralizavimas | Alkaus santykis, lizavimo laikas |
Aiškinimas | Filtracija | Pirmasis filtravimas, 20 µm ir 5 µm filtras (pagrįstas) |
Koncentracija | Ultrafiltravimas, tangencialus srautas filtravimui | Porų dydis (ar NMWC), Per membraną veikianti slėgio skirtumas (TMP), Srauto intensyvumas, filtrato tūrio prie membranos ploties santykis |
Trispakopė chromatografija | Dyžio atskyrimo chromatografija (SEC) arba gels filtro chromatografija (GFC) | Stulpelio ilgis ir skersmuo, buferio sudėtis, įtraukimo tūris, judančiosios fazyės sudėtis (absorbcijai ir atsiskirtimui), pH, srauto greitis, balansavimo, susiejimo, plautimo ir atsiskirčio sąlygos. |
Afininė chromatografija (AF) | ||
Anionų keitimo chromatografija (AEX) | ||
Koncentracija | Ultrafiltravimas, tangencialus srautas filtravimui | Porų dydis (ar NMWC), Per membraną veikianti slėgio skirtumas (TMP), Srauto intensyvumas, filtrato tūrio prie membranos ploties santykis |
Daugiau biologinių švarinimo procesų sprendimų |