Inkapsuliacijos pagrindas yra pristatymo sistemos projektavimas ir kūrimas. Gerai suprojektuota pristatymo sistema leidžia circRNA molekuloms patekti į organizma, nesugadintoms RNA enzimais, o tada efektyviai būti pristatomos į tikslinį vietą, perskristi ląstelės membraną ir intraceliariai išleisti.
Lipidiniai nanodžiuliai (LNPs) yra geriausias prieinamas pristatymo sistema, turinti privalumų kapsuliacijos, gyvojo organizmo išraiškos ir gyvojo organizmo saugumo srityse lyginant su kitomis pristatymo sistemomis. LNPs su nukleorūgščių fragmentais lengvai sutrikdo į ląstelę ir formuoja vidaus ląstelės kūno. Kai įeina į ląstelę, vidaus ląstelės kūno rūgštus aplinkovas protonuoja ir teigiamai kratojasi ionizuoto lipidinio galvio galvu, taip susijungiant su vidaus ląstelės kūno vidiniu membrana ir išleisdami tikslią nukleorūgščių į ląstelę veiksmui.
Yaohai Bio-Pharma circRNA paslauga toliau tobulėja ir gali teikti circRNA-LNP kapsuliacijos paslaugą, optimizuojant relevantinius kritinius procesinius parametrus ir pagerindami circRNA vaistų gamybos sutaprimą ir atkaitingumą.
Procesas | Paslaugų detalės | Pristatymo laikotarpis (diena) | Pateikiami rezultatai |
circRNA-LNP inkapsulavimas | Medžiagos ir skysčių iš anksto apdorojimas | 2 | circRNA-LNP vaistinis produktas (DP) |
Mikrofluidinio įrenginio maišymas | |||
Tangencialus srautas suodinimo | 1 | ||
Sterilizavimo filtracija | |||
circRNA-LNP kokybės kontrolė | Apdengimo efektyvumas | 1 | TESTAVIMO ATASKAITA |
Dalelių dydis ir polidispersijos indeksas | |||
Zetos potencialas |
Greitas sintezė, aukšta R&D efektyvumas ir iš anksto optimizuotos sprendimai;
Apdengimo santykis gali pasiekti daugiau nei 90%;
Lipidinių nanodžiugų dydis gali būti kontroliuojamas keičiant skysčio įdejimo greičiu ir santykiu;
circRNA-LNP produktai patvirtinami in vitro ląstelių išraiška ir gali efektyviai išreikšti tikslinį baltymą.
LNP-eGFP circRNA imties paruošiamos, o jų skirtingi dozės (1ug, 2ug ir 4ug) tiesiogiai perkeltos į 293T ląstelę, kad patikrinti, ar jos gali išreikšti tikslinį baltymą. Perkėlimo metu po 48 valandų matomas aiškus fluorescencijos signalas, o fluorescencijos stiprumas rodo dozės padidėjimo efektą.
Lipo-circ_eGFP, sudarytas iš liposomo ir neapdengto eGFP circRNA, naudojamas kaip kontrolė.