CircRNA 준비에는 고리화를 위한 전구체 물질(RNA 전구체)로 선형 RNA가 필요하며, 여기서 RNA 전구체는 일반적으로 선형화된 플라스미드 DNA를 전사 주형으로 사용하여 준비되고 T7 RNA 폴리머라제의 도움으로 시험관 내에서 전사됩니다.
시험관내 전사(IVT)에는 고품질 플라스미드 DNA가 필수적입니다. 성숙한 플라스미드 준비 서비스 플랫폼을 기반으로 Yaohai Bio-Pharma는 IVT 제품의 무결성을 보장하기 위해 고순도 표준 선형 플라스미드 DNA(pDNA) 준비 서비스를 제공할 수 있습니다.
방법 | 선택서비스 | 서비스 내용 | 배송기간(평일) |
원형 플라스미드 준비 | 유전자 합성 | 유전자 합성(제3자) | 7-10 |
플라스미드 증폭 | 플라스미드 증폭 | 2 | |
플라스미드 추출 | |||
선형화된 플라스미드 준비 | 플라스미드 선형화 및 정제 | 플라스미드 선형화 | 1 |
선형화 DNA 정제 | |||
플라스미드 DNA 품질 관리 | 농도 순도 | 자외선(UV) 분광광도법 | 1-2 |
플라스미드 형태 | 아가로스 겔 전기영동(AGE) | ||
모세관 전기영동(CE) - 선택 사항 | |||
플라스미드 식별 | 제한효소 식별/AGE |
선형화 방법의 유연한 선택
높은 회수율을 달성하기 위해 DNA 추출 및 정제 방법을 최적화합니다.
연구용 플라스미드 샘플의 초나선형 형태 비율이 80% 이상인 엄격한 공정 제어 표준.
실험 요구 사항을 충족하기 위한 높은 표준 및 고효율 플라스미드 준비 및 품질 관리 서비스.
Yaohai Bio-Pharma의 제품인 mCherry circRNA를 예로 들면 전사 템플릿 플라스미드 샘플(연구 등급)의 슈퍼코일 비율은 70% 이상이며 선형화 비율은 100%에 가깝습니다.
mCherry circRNA는 선형화된 플라스미드를 주형으로 사용하여 제조되고 293T 세포에 형질감염됩니다. 높은 수준의 형광 발현(적색 형광)은 형질감염 24시간 후에 검출되며, 이는 48시간 후에 향상되며 형질감염 후 7일과 14일째에도 여전히 검출될 수 있습니다.
mCherry 단백질은 안정적이고 효율적으로 발현되며 전사 템플릿 순도는 고품질의 circRNA 의약품(DP) 요구 사항을 충족할 수 있습니다.
mCherry circRNA의 시험관 내 발현 검증