원형 mRNA(circRNA)는 유전자나 단백질 기능 연구에 널리 사용되어 왔습니다. 한편, mRNA와 유사한 예방 및 치료 생물학적 제제 개발에 인기가 높습니다.
Yaohai Bio-Pharma는 서열 설계 및 최적화, 시험관 내 전사(IVT), 원형화/고리화, 정제, 지질 나노입자(LNP) 캡슐화 등 고품질 RNA를 제공하기 위한 일련의 circRNA 합성 기술을 확립했습니다. 모든 제품은 엄격한 품질관리(QC) 기준에 따라 출시됩니다.
선형 mRNA와 비교하여 원형 RNA(circRNA)는 구조가 더 안정적이며 현재 핵산 약물 연구에서 주요 핫스팟입니다. 이는 감염성 질병에 대한 예방 백신, 치료 종양학 백신, 치료 종양학 약물, 단백질 대체 요법, 재생 의학, 세포 및 유전자 치료(CGT)를 포함하여 코딩 circRNA 또는 비코딩 circRNA 등 다양한 분야에서 광범위한 응용 분야를 가지고 있습니다. , 분자 스폰지 역할 및 RNA 앱 타머.
방법 | 선택서비스 | 서비스 내용 | 배송기간(일) |
circRNA 서열 설계 및 최적화 | 코딩 시퀀스의 설계 및 최적화 | CDS 코돈 최적화 | 1 |
비코딩 시퀀스의 설계 및 최적화 | 인트론 및 엑손 서열, 상동성 암 및 스페이서 설계 및 최적화 | 1-2 | |
원형 플라스미드 준비 | 유전자 합성 | 유전자 합성(타사) | 7-10 |
플라스미드 증폭 | 플라스미드 증폭 | 2 | |
플라스미드 추출 | |||
선형화된 플라스미드 준비 | 플라스미드 선형화 및 정제 | 플라스미드 선형화 | 1 |
선형화 DNA 정제 | |||
시험관 내 전사 및 고리화 | 시험관 내 전사 및 고리화 | 시험관 내 전사 및 고리화 반응 | 1-2 |
RNase R 소화 | |||
최적화-선택사항 | 반응 조성, 시간 최적화 | 2-5 | |
circRNA 정제 | 기존 정제방법 | 염화리튬 침전 | 1 |
자기 비드 정제 | 1 | ||
고순도 circRNA 정제 | 분취용 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) | 1-2 | |
버퍼 교환 | 한외 여과 | 1 | |
circRNA 동결건조 | 샘플 충전 | 충전 | 2-3 |
동결 건조 | 사전 동결 | ||
1차 건조(승화) | |||
2차 건조(탈착) | |||
circRNA-LNP 캡슐화 | LNP 캡슐화 | 재료 및 액체 전처리 | 2 |
미세유체 장치 혼합 | |||
버퍼 교환 | 접선 흐름 여과 | 1 | |
살균 | 여과기 | ||
플라스미드 DNA의 품질 관리 | 농도/순도 | 자외선(UV) 분광광도법 | 1-2 |
플라스미드 형태 | 아가로스 겔 전기영동(AGE) | ||
모세관 전기영동(CE) - 선택 사항 | |||
플라스미드 식별 | 제한 효소 식별/나이 | ||
circRNA의 품질 관리 | 농도/순도 | 자외선(UV) 분광광도법 | - |
청정 | 아가로스 겔 전기영동(AGE)/E-겔 | 0.5 | |
HPLC-선택 사항 | 1 | ||
circRNA-LNP의 품질 관리 | 캡슐화 효율성 | RiboGreen 방법 | 1 |
입자 크기 | 동적 광산란(DLS) | 1 | |
다분산 지수 | 동적 광산란(DLS) | 1 | |
제타 전위 | 동적 광산란(DLS) | 1 | |
세포 기반 효능 분석 | 세포 형질감염 | 세포 도금, 세포 형질 감염 | 4 |
표적 단백질 검출 | 형광 관찰, 웨스턴 블롯/ELISA | 1-3 |
우리는 강화된 녹색 형광 단백질 circRNA(eGFP circRNA), mCherry circRNA, 루시퍼라제 circRNA를 293T 세포에 형질감염시키고 형광, 발광 또는 색상 신호, 웨스턴 블롯(WB), 효소 결합 면역흡착 분석(ELISA)을 통해 표적 단백질을 검출했습니다.
Yaohai Bio-Pharma의 circRNA 샘플에 대한 세포 기반 효능 분석