再構成タンパク質の品質管理と応用

再合成タンパク質の品質管理は、実験データの信頼性と再現性にとって重要です。プロジェクト設計から生産プロセスまでのすべてのステップで、厳格な品質管理戦略が必要です。

品質管理戦略

工業部門は厳密な標準作業手順に従っていますが、学術界はデータの再現性を向上させるために専門知識を強化する必要があります。特定の生物学的用途や生化学的特性を持つタンパク質には、カスタマイズされた品質管理（QC）戦略が必要です。

挑戦的な例と解決策

ヤオハイ・バイオファーマは、再合成タンパク質の生産と精製において広範な経験を持ち、専門家チームがそれを支えています。これにより、タンパク質の生産が高純度で完了することを保証します。数百のプロジェクトでの経験に基づき、ヤオハイはタンパク質精製を最適化する方法を親切にまとめました。

核酸結合タンパク質： 核酸除去ステップ、例えば核酸分解酵素やPEI沈殿が必要です。A260nm/A280nm比は核酸汚染を検出するために監視されます。

クライオ電子顕微鏡用マウスフェリチンヘビーチェイン1: 精製ステップを最適化し、核酸分解酵素を添加してA260nm/A280nm比を低下させ、タンパク質の純度を確保する必要があります。

キメラタンパク質ヒトdsRBEC: 細胞裂解には尿素を含むバッファーが使用され、その後カラム上で再構成が行われて機能的に活性のあるタンパク質が得られます。

二価カチオン結合タンパク質: 表現および精製中に特定の二価カチオンを添加する必要があり、キレート剤は避けるべきです。

鉄硫黄クラスター含有タンパク質: [2Fe-2S]クラスターの破壊を防ぐため、イミダゾールは避けるべきであり、正しいタンパク質の折り畳みと機能を確保します。

LLT1の可溶性フラグメント: 突然変異型設計は二硫化結合の形成とタンパク質の折り畳みを最適化し、安定で高収量のタンパク質を得ます。

CLK1キナーゼ結晶化： Λホスファターゼとの共発現により、リン酸化部位からのリン酸が除去され、サイズ排阻クロマトグラフィー（SEC）および陰イオン交換クロマトグラフィーを使用して、非均一なリン酸化のない均一なCLK1が得られます。

抗原用タンパク質： 高免疫原性を持つタンパク質による汚染を避けるため、純度評価が必要です。構造的エピトープ抗体の場合、抗原の三次元構造を維持する必要があります。

凝集しやすいタンパク質： 異なる菌株のスクリーニングや培養温度の低下などの戦略が採用され、凝集体の問題を制限します。また、迅速な精製戦略が設計されます。

エンドトキシン除去： 陽子チャージクロマトグラフィーやポリカチオンリガンドアフィニティクロマトグラフィーなどの方法により、エンドトキシンが除去され、LPSレベルが使用限度以下に保たれます。

タンパク質複合体： サブユニットは別々に表現され、体外で組み立てられるか、共発現されて機能的な複合体を形成する。複合体の完全性は均一性とモル質量によって評価される。

結論

タンパク質の生産は、生化学的特性や応用を考慮した戦略的な設計から始まる。発現、精製、品質管理の過程で、安定性、非凝集性、および天然状態を最適化するための条件や方法が調整される。精製されたタンパク質は、生物理的特性の評価など、様々な後続用途に使用される。

ヤオハイ・バイオファーマは、また積極的に世界的な機関や個人のパートナーを求め、業界で最も競争力のある報酬を提供しています。ご質問がある場合は、お気軽にお問い合わせください： BD@yaohaibio.cn