プラスミド: 大きな可能性を秘めた小さな環状 DNA 分子

小さな環状 DNA 分子であるプラスミドは、分子生物学研究や遺伝子治療における DNA 組み換えに不可欠なベクターとして機能します。プラスミドの収量と品質は極めて重要であり、スーパーコイルの割合とエンドトキシン含有量はプラスミドの品質に影響を与える 2 つの重要な要素です。

プラスミドのサブタイプ

大腸菌（E. coli）から抽出されたプラスミドには、スーパーコイル型（SC）、開環型（OC）、線状型（L）のさまざまなサブタイプが存在します（図1）。その中でも、スーパーコイル型プラスミドは優れた安定性、抗原性、高いトランスフェクション効率と発現効率を示します。

図1. 一般的なプラスミドサブタイプの模式図

プラスミド DNA のアガロースゲル電気泳動では、移動速度の順序はスーパーコイル DNA、線状 DNA、開環状 DNA です (図 2)。

図2. 異なるプラスミドサブタイプのアガロースゲル電気泳動移動パターン

Yaohai Bio-Pharma は、トランスフェクショングレードのプラスミドのスーパーコイル率が 85% 以上、研究グレードのプラスミドのスーパーコイル率が 50% 以上になるように、プロセスと技術を継続的に改善してきました。以下は、アガロースゲル電気泳動と Gel-Pro Analyzer ソフトウェアを組み合わせてスーパーコイル率を検出するケースのデモンストレーションです (図 3)。

図3. プラスミドスーパーコイル率の品質検査結果

エンドトキシン

グラム陰性細菌の細胞壁の成分であるエンドトキシンは、主にリポ多糖 A (LPS-A) を毒性成分として含んでいます。プラスミド抽出中に、エンドトキシンは溶解液に放出され、細胞へのプラスミドのトランスフェクションの効率に重大な影響を及ぼします。さらに、細胞内で非特異的免疫反応を活性化し、実験で偽陽性を引き起こす可能性があります。

Yaohai Bio-Pharma は「非導入」と「高除去」のアプローチを採用し、精製プロセス全体を通じてエンドトキシンを含む試薬と材料の使用を厳密に制御しています。また、同社は効率的なエンドトキシン除去方法を開発し、エンドトキシン含有量を ≤0.1 EU/µg、≤0.01 EU/µg、≤0.005 EU/µg の XNUMX つのレベルにしています。

Yaohai Bio-Pharma は、ハイスループットのプラスミド抽出サービス ラインを所有しており、抽出したプラスミド 1 mg を最短 XNUMX 週間で提供できます。デフォルトでは、XNUMX つ以上の品質管理 (QC) テストが提供され、さまざまな観点から高品質で高水準のプラスミドの提供が保証されます。

当社は、グローバルな機関または個人のパートナーも積極的に募集しています。当社は業界で最も競争力のある報酬を提供しています。ご質問がございましたら、お気軽にお問い合わせください。 [email protected]