Il Processo di Produzione e le Applicazioni dei Nanocorpi
Mirando a virus specifici o strutture, gli anticorpi ingegnerizzati possono potenzialmente trattare alcune popolazioni ad alto rischio. Tuttavia, simile ai monoclonali, la loro applicazione su vasta scala è ostacolata dai costi elevati di produzione e dalle loro grandi dimensioni (tipicamente con un peso molecolare di 150 kDa).
Successivamente, è stata scoperta una nuova tipologia di anticorpo nei camelidi. Questi "anticorpi solo a catena pesante" mancano di catene leggere e sono composti da due domini costanti, una regione cardine e una catena variabile pesante (VHH) nota come nanocorpo (Nanobody, Nb). Questi Nbs sono piccoli di dimensione (15 kDa), possiedono alta specificità e hanno una lunga vita mezza, il che li rende candidati ideali per l'uso in situazioni di emergenza come pandemie o epidemie.
Processo di produzione dei Nbs
La libreria Nb viene costruita immunizzando animali con antigeni di destinazione, successivamente isolando le cellule mononucleari del sangue periferico dagli animali e estraendo il DNA che codifica i domini variabili degli anticorpi a catena pesante. In particolare, gli animali cameline vengono immunizzati con l'antigene di destinazione e il DNA che codifica gli anticorpi a catena pesante viene estratto. Questo DNA viene poi clonato in un vettore di display batteriofagico. Attraverso un processo di selezione dei batteriofagi che si legano all' proteina di destinazione, vengono arricchiti quelli che mostrano una forte legame con Nbs. Questo processo di selezione e arricchimento viene ripetuto molte volte. Infine, vengono sequenziati cloni individuali per determinare le sequenze uniche di Nb.
Una volta determinate le sequenze, viene effettimata un'ulteriore ottimizzazione attraverso tecniche di mutagenesi o maturazione dell'affinità per migliorarne l'affinità di legame o specificità. I risultanti Nbs possono essere prodotti in grandi quantità tramite sistemi di espressione batterica o altre tecnologie ricombinanti.
Grazie a più di 10 anni di esperienza in CDMO nel campo dei biologici microbici, Yaohai Bio-Pharma supporta lo sviluppo e la produzione di vari Nbs. Yaohai eccelle nella selezione di diversi ospiti microbici, inclusi Batteri Escherichia Coli e diverse lieviti per aiutare i clienti a trovare il miglior sistema di espressione per gli Nbs.
Applicazioni degli Nbs nella Terapia Antivirale
Individuazione di Glicoproteine Virali: Gli Nbs targettizzano specificamente le glicoproteine sulla superficie dei virus, come la proteina spike di SARS-CoV-2, bloccando efficacemente l'ingresso e la replicazione virale. Gli studi preclinici indicano il loro potenziale come terapia contro il SARS-CoV-2.
Prevenzione delle Interazioni Ospite-Virus: Gli Nbs si legano a proteine cellulari critiche coinvolte nell'attacco e nell'ingresso virale, come l'Enzima di Converione dell'Angiotensina I-2 (ACE2), impedendo al virus di entrare nelle cellule dell'ospite.
Ruoli Immunomodulatori: Oltre a mirare alle proteine virali, gli Nbs modulano l'immunità potenziando l'uccisione cellulare mediata da anticorpi, migliorando le cellule/molecole immunitarie antivirali, combinandosi con altre terapie, inibendo la replicazione virale e regolando i citochini per prevenire l'inflamazione e il danno ai tessuti.
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