La magia di P. pastoris: modellare la produzione di proteine ​​ricombinanti

Le proteine ​​ricombinanti, che sono proteine ​​espresse nelle cellule ospiti tramite tecniche di ingegneria genetica, hanno trovato applicazioni diffuse nella ricerca biomedica, nella terapia e nella diagnostica. La selezione di un sistema di espressione appropriato è un fattore cruciale per l'espressione di successo delle proteine ​​ricombinanti.

Yaohai Bio-Pharma vanta oltre un decennio di esperienza nella costruzione e produzione di librerie di ceppi di lievito. In questo articolo, Yaohai approfondirà i dettagli del sistema di espressione di Pichia pastoris (P. pastoris) della proteina ricombinante.

P. pastoris come sistema di espressione di proteine ​​ricombinanti

P. pastoris, in quanto lievito metilotrofico, è in grado di utilizzare in modo efficiente composti C1 come il metanolo, il che lo rende un ospite ideale per la produzione di proteine ​​ricombinanti. Il processo prevede l'introduzione di un vettore che trasporta il DNA target nel lievito, sfruttando le proprietà cellulari eucariotiche del lievito per esprimere la proteina ricombinante. Il sistema di espressione genica eterologa che utilizza P. pastoris come ospite si è sviluppato rapidamente negli ultimi anni ed è riconosciuto come uno strumento importante e ampiamente accettato nella biologia molecolare per la produzione di proteine ​​ricombinanti.

Strategia per la P. pastoris sistema di espressione

Strategie di ottimizzazione per P. pastoris processi di fermentazione

Per migliorare l'efficacia dei processi di fermentazione, è fondamentale integrare le manipolazioni dei ceppi e adottare varie strategie durante la fermentazione di P. pastoris. Sebbene esistano condizioni comunemente utilizzate per la fermentazione di P. pastoris, le condizioni ottimali dipendono fortemente dal prodotto desiderato, dalla composizione genetica impiegata e dal fatto che la regolazione del prodotto venga ottenuta tramite un promotore costitutivo o inducibile. I fattori chiave per un miglioramento, un'ottimizzazione e una simulazione di successo in P. pastoris includono la regolazione dei parametri di fermentazione, la selezione delle modalità operative e l'utilizzo di modelli matematici. L'ottimizzazione del processo di fermentazione comporta la selezione precisa di parametri quali temperatura, pH, composizione del mezzo e ossigeno disciolto, nonché l'adozione di modalità operative idonee come la fermentazione continua e fed-batch. Inoltre, modelli metabolici su scala genomica e metodi matematici possono essere sfruttati per perfezionare l'ottimizzazione del processo di fermentazione.

Conclusione

Rispetto ai batteri, P. pastoris, in quanto organismo eucariotico, mostra vantaggi unici nel processo di fermentazione. Pertanto, P. pastoris è riconosciuto come una piattaforma microbica importante per la produzione di proteine ​​ricombinanti. Per ottenere l'elevata resa della proteina desiderata, è necessaria l'ottimizzazione del processo.

Lo sviluppo efficiente e rapido della banca cellulare è fondamentale per il processo di lancio del prodotto. Se hai bisogno di costruire P. pastoris o altri ceppi di lievito, Yaohai può fornirti una vasta esperienza nella costruzione di banche cellulari microbiche, una guida normativa professionale e servizi CDMO one-stop. Abbiamo progettato una roadmap di sviluppo ragionevole che riduce al minimo il ciclo di sviluppo CMC di prodotti biologici ricombinanti evitando al contempo i rischi.

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