Il fascino di P. pastoris: plasmare la produzione di proteine ricombinanti

Le proteine ricombinanti, che sono proteine espressi in cellule ospiti attraverso tecniche di ingegneria genetica, hanno trovato applicazioni diffuse nella ricerca biomedica, nella terapia e nella diagnostica. La selezione di un sistema di espressione appropriato è un fattore cruciale per il successo dell'espressione delle proteine ricombinanti.

Yaohai Bio-Pharma si vanta di avere più di un decennio di esperienza nella costruzione della libreria di ceppi di lievito e nella produzione. In questo articolo, Yaohai illustrerà i dettagli del sistema di espressione di Pichia pastoris (P. pastoris) per le proteine ricombinanti.

P. pastoris come sistema di espressione per proteine ricombinanti

P. pastoris, essendo un lievito metilotrofico, è in grado di utilizzare efficacemente composti C1 come il metanolo, il che lo rende un ospite ideale per la produzione di proteine ricombinanti. Il processo prevede l'introduzione di un vettore contenente il DNA di destinazione nel lievito, sfruttando le proprietà cellulari eucariotiche del lievito per esprimere la proteina ricombinante. Il sistema di espressione genica eterologa utilizzando P. pastoris come ospite si è sviluppato rapidamente negli ultimi anni ed è riconosciuto come uno strumento importante e ampiamente accettato nella biologia molecolare per la produzione di proteine ricombinanti.

Strategia per il P. pastoris sistema di espressione

Strategie di ottimizzazione per P. pastoris processi di fermentazione

Per migliorare l'efficacia dei processi di fermentazione, integrare manipolazioni di ceppi e adottare varie strategie durante la fermentazione di P. pastoris è fondamentale. Sebbene esistano condizioni comunemente utilizzate per la fermentazione di P. pastoris, le condizioni ottimali dipendono fortemente dal prodotto desiderato, dalla composizione genetica impiegata e da ciò che determina se il regolamento del prodotto avviene tramite un promotore costitutivo o induttivo. Fattori chiave per un miglioramento, ottimizzazione e simulazione efficaci in P. pastoris includono l'aggiustamento dei parametri di fermentazione, la selezione delle modalità operative e l'utilizzo di modelli matematici. L'ottimizzazione del processo di fermentazione prevede una selezione precisa di parametri come temperatura, pH, composizione del mezzo di coltura e ossigeno disciolto, nonché l'adozione di modalità operative appropriate come fermentazione continua e a batch alimentato. Inoltre, i modelli metabolici a scala genomica e i metodi matematici possono essere utilizzati per raffinare l'ottimizzazione del processo di fermentazione.

Conclusione

In confronto ai batteri, P. pastoris, come organismo eucariota, presenta vantaggi unici nel processo di fermentazione. Pertanto, P. pastoris è riconosciuto come una delle principali piattaforme microbiche per la produzione di proteine ricombinanti. Per raggiungere un alto rendimento della proteina desiderata, è necessario ottimizzare il processo.

Lo sviluppo rapido ed efficiente del banking cellulare è fondamentale per il processo di lancio del prodotto. Se hai bisogno di costruire P. pastoris o altre specie di lieviti, Yaohai può fornirti un'ampia esperienza nella costruzione del banking cellulare microbico, guida regolatoria professionale e servizi CDMO integrati. Abbiamo progettato un piano di sviluppo ragionevole che minimizza il ciclo di sviluppo CMC dei prodotti biologici ricombinanti evitando rischi.

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