metodi di Purificazione dell'mRNA Aggiornati nel 2024

La purificazione, un passo fondamentale nella produzione di mRNA, prevede la rimozione di impurità come sostanze chimiche non reattive o residui.

Il processo di purificazione garantisce la coerenza tra i lotti di mRNA e formulazioni di nanoparticelle lipidiche (LNP), rimuovendo componenti instabili e migliorando così la loro biodisponibilità ed efficacia in vivo.

Ecco alcuni metodi comuni di purificazione:

1. Precipitazione con cloruro di litio : il RNA forma complessi con cloruro di litio e alcol, precipitando successivamente; si utilizza la centrifuga per separare il precipitato di RNA per la purificazione;

2. Purificazione con palline magnetiche: Le palline magnetiche modificate sulla superficie si legano selettivamente al RNA, consentendo una purificazione rapida ed efficiente tramite movimento controllato con un campo magnetico;

3. Cromatografia affinitativa: Si utilizza l'affinità tra il poliA del mRNA e l'oligo dT per catturare il RNA e rimuovere le impurità;

4. Cromatografia ionica: Sfruttando le differenze nelle interazioni tra RNA e gruppi di scambio ionico, la separazione e la purificazione dell'RNA vengono realizzate regolando la forza ionica e il pH nella colonna di scambio ionico.

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