Metodi di purificazione dell'mRNA aggiornati al 2024

La purificazione, una fase cruciale nella produzione di mRNA, comporta la rimozione di impurità come sostanze chimiche non reagite o materiali residui.

Il processo di purificazione garantisce la coerenza tra i lotti delle formulazioni di mRNA e nanoparticelle lipidiche (LNP), rimuovendo i componenti instabili e migliorandone così la biodisponibilità e l'efficacia in vivo.

Ecco alcuni metodi di purificazione comuni:

1. Precipitazione del cloruro di litio: L'RNA forma complessi con cloruro di litio e alcol, precipitando, seguiti da centrifugazione per separare il precipitato di RNA per la purificazione;

2. Purificazione con sfere magnetiche: Le sfere magnetiche modificate in superficie si legano selettivamente all'RNA, consentendo una purificazione rapida ed efficiente tramite movimento controllato con un campo magnetico;

3. Cromatografia di affinità: Utilizzando l'affinità tra mRNA polyA e oligo dT per catturare l'RNA e rimuovere le impurità;

4. Cromatografia a scambio ionico: Sfruttando le differenze nelle interazioni tra RNA e gruppi di scambio ionico, la separazione e la purificazione dell'RNA vengono ottenute regolando la forza ionica e il pH nella colonna di scambio ionico.

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