Exploitation des IB bactériens pour la production de protéines recombinantes
Les corps d'inclusion bactériens (IBs) dans la production de protéines recombinantes offrent une facilité de séparation, une stabilité, une expression élevée et une résistance à la dégradation, et peuvent exprimer des protéines toxiques avec une activité biologique. Les progrès dans la compréhension des IBs ouvrent de nouvelles voies de traitement, avec des défis et des solutions identifiés pour les recherches futures.
Yaohai Bio-Pharma dispose de plus de 10 ans d'expérience dans la production de protéines recombinantes à l'aide de systèmes de fermentation microbienne. Notre solide équipe d'experts professionnels garantit que la protéine purifiée et refoldée peut atteindre 1,5 g/L.
Stratégies de traitement et défis des IBs
Séparation des IBs Les méthodes de séparation des IB dépendent de la structure-fonction des protéines et des besoins de l'application. Les méthodes physiques perturbent les cellules mais peuvent endommager la qualité des protéines. Les méthodes enzymatiques améliorent la pureté mais sont coûteuses. Les détergents doux fonctionnent pour les IB classiques, pas pour les non-classiques. Le contrôle du pH est crucial pour la solubilité. Le dépôt par électrophorèse est simple mais pas évolutif pour les protéines biologiquement actives.
Solubilisation des IB La solubilisation des IB est cruciale pour récupérer des protéines actives. Les dénaturants forts endommagent la structure native, tandis que les non-dénaturants ne conviennent pas aux IB classiques. Les solubilisateurs doux peuvent dissoudre les IB tout en protégeant la structure des protéines, mais pas pour toutes les protéines. Des travaux futurs nécessitent de meilleurs algorithmes pour sélectionner les solubilisateurs.
Stratégies de renaturation La renaturation des protéines est essentielle pour leur fonctionnalité. La renaturation in vitro fait face à des défis. Le choix du solubilisateur, la concentration en protéines, les conditions et les méthodes influencent le résultat. Les solubilisateurs doux protègent la structure native et améliorent la qualité. Des concentrations modérées et des conditions optimisées réduisent l'agrégation. Les méthodes basées sur colonnes avec matrices monolithiques offrent une pureté et un rendement plus élevés.
Purification des Protéines Renaturées Une purification supplémentaire sépare les protéines mal repliées de celles correctement repliées. La chromatographie traditionnelle peine à différencier des protéines similaires. Les méthodes alternatives offrent des avantages mais nécessitent une sélection spécifique à la protéine cible. Le développement d'une méthode de purification universelle reste un défi.
Conclusion
Les IB offrent des avantages dans la production de protéines recombinantes, mais posent des défis en matière de traitement. Avec une compréhension plus approfondie de la structure-fonction des protéines au sein des IB et des progrès dans la séparation, la solubilisation, la renaturation et la purification, il sera bientôt possible de récupérer à haut débit des protéines actives. Cela réduira les coûts et accélérera le développement et la recherche en biopharmaceutique, stimulant ainsi la croissance de l'industrie.
Yaohai Bio-Pharma recherche également activement des partenaires institutionnels ou individuels à l'échelle mondiale et propose la rémunération la plus compétitive de l'industrie. Si vous avez des questions, n'hésitez pas à nous contacter : BD@yaohaibio.cn
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