إنتاج البروتين المعاد التركيب: سلالات الإشريكية القولونية المعدلة وراثيًا

لعبت البكتيريا الإشريكية القولونية (E. coli) دورًا مهمًا في إنتاج البروتينات المعاد تركيبها في صناعة الأدوية الحيوية، حيث تعمل كأول ناقل تعبيري لتصنيع الأدوية البيولوجية. تتميز البكتيريا الإشريكية القولونية بالنمو السريع، والتلاعب الجيني المريح، والتخليق السريع للبروتينات المعاد تركيبها، من بين مزايا أخرى. جعلت التعديلات المكثفة من البكتيريا الإشريكية القولونية الخيار الأمثل للتعبير عن البروتين، مما أدى إلى تصميم سلالات مختلفة من البكتيريا الإشريكية القولونية.

تتخصص شركة Yaohai Bio-Pharma في تقديم خدمات الاستعانة بمصادر خارجية شاملة لعمليات التخمير والتنقية وتطوير عملية الصياغة وإنتاج سلسلة من المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أنظمة التعبير عن البكتيريا القولونية. وفيما يتعلق بالخبرة الواسعة لشركة Yaohai، فقد لخصنا أن أربعة سلالات شائعة من البكتيريا القولونية تُستخدم لإنتاج البروتين المعاد التركيب وخصائصها.

سلالة BL 21

تفتقر سلالة BL21، المشتقة من سلالة E. coli B، إلى بروتياز Lon وبروتياز الغشاء الخارجي OmpT. يعمل بروتياز Lon في المقام الأول على تحلل البروتينات الخارجية، بينما يعمل OmpT بشكل أساسي على تحلل بروتينات المصفوفة خارج الخلية. يمكن أن يؤدي غياب هذين البروتيازين الرئيسيين إلى منع تحلل البروتينات المعاد تركيبها بشكل فعال.

سلالة الأوريجامي

سلالة أوريجامي، وهي مشتقة من البكتيريا القولونية K-12، لديها طفرات في إنزيم اختزال الثيوردوكسين وإنزيم اختزال الجلوتاثيون، مما يسهل تكوين البروتينات المطوية بشكل صحيح والتي تحتوي على روابط ثنائي الكبريتيد ويعزز قابلية ذوبان البروتين. سلالة أوريجامي، بما في ذلك أوريجامي وأوريجامي 2 وأوريجامي ب، مناسبة للتعبير عن البروتينات النشطة التي تحتوي على روابط ثنائي الكبريتيد.

سلالة SHuffle

يعبر سلالة SHuffle بشكل تكويني عن إيزوميراز الرابطة ثنائية الكبريتيد DsbC في السيتوبلازم، مما يعزز تكوين الروابط ثنائية الكبريتيد الصحيحة في البروتينات المؤكسدة. كما يعمل كمرافق جزيئي لطي البروتين، مما يساعد في تكوين التكوين الصحيح.

سلالة روزيتا

تكمل سلالة روزيتا البكتيريا القولونية بـ tRNAs المقابلة للكودونات النادرة، بهدف تحسين مستوى التعبير عن الجينات الخارجية، وخاصة الجينات حقيقية النواة، في الأنظمة البدائية. وهي مشتقة من BL21 وتحمل بلازميد pRARE المقاوم للكلورامفينيكول، وتكمل ستة tRNAs المقابلة للكودونات النادرة (AUA وAGG وAGA وCUA وCCC وGGA) الغائبة أصلاً في البكتيريا القولونية، مما يوفر تعبيرًا بروتينيًا "أكثر عالمية".

وفي الختام

العوامل الرئيسية الثلاثة لإنتاج البروتينات المعاد تركيبها بنجاح هي المضيف والناقل وظروف الثقافة. بناءً على فهم الخصائص الفيزيائية والكيميائية للبروتين المعاد تركيبه، والمزايا الفريدة لكل سلالة، والاحتياجات المحددة للتجربة، يجب اختيار المضيف الأكثر ملاءمة. بالإضافة إلى ذلك، يجب تحسين عوامل مثل ناقلات البلازميد ودرجة الحرارة والمحفزات لتعزيز التعبير عن البروتين.

كما تسعى شركة Yaohai Bio-Pharma بنشاط إلى استقطاب شركاء عالميين من المؤسسات أو الأفراد وتقدم التعويضات الأكثر تنافسية في الصناعة. إذا كانت لديك أي أسئلة، فلا تتردد في الاتصال بنا: [email protected]