إنتاج البروتينات المركبة: سلالات الإي كولاي المعدلة وراثيًا

لعبت Escherichia coli (E. coli) دورًا مهمًا في إنتاج البروتينات المُعاد تشكيلها في صناعة الأدوية البيولوجية، حيث خدمت كأول متجه تعبيري لتصنيع الدواء البيولوجي. تتميز E. coli بنمو سريع، وسهولة التعديل الوراثي، وإنتاج سريع للبروتينات المُعاد تشكيلها من بين مزايا أخرى. أدت التعديلات الواسعة إلى جعل E. coli الخيار الأمثل لإنتاج البروتينات، مما أدى إلى تصميم سلالات مختلفة من E. coli مهندسة وراثيًا.

تتخصص Yaohai Bio-Pharma في تقديم خدمات التفويض الشاملة لتخمير، تنقية، تطوير صياغة العمليات، وإنتاج سلسلة من الأدوية البيولوجية باستخدام أنظمة التعبير عن E. coli. بناءً على الخبرة الواسعة لـ Yaohai، تم تلخيص أن هناك أربع سلالات شائعة من E. coli تُستخدم لإنتاج البروتينات المُعاد تشكيلها وميزاتها.

السلالة BL 21

مشتقة من سلالة E. coli B، تحتوي سلالة BL21 على نقص في إنزيم Lon البروتيني وإنزيم OmpT البروتيني الخارجي. يُركّز إنزيم Lon البروتيني على تحلل البروتينات الخارجية، بينما يقوم OmpT بشكل أساسي بتحليل بروتينات مصفوفة خارج الخلية. غياب هذين الإنزيم البروتينيين الرئيسيين يمكن أن يمنع بشكل فعال تحلل البروتينات المركبة.

سلالة Origami

سلالة Origami، وهي مشتقة من E. coli K-12، تحتوي على طفرات في ترانسريدوكسين ريدكتاز وجلوتاثيون ريدكتاز، مما يساعد في تكوين بروتينات متواجدة بشكل صحيح تحتوي على روابط ثنائي الكبريت ويزيد من ذوبانية البروتين. تصلح سلالات Origami بما في ذلك Origami، Origami 2، وOrigami B لتعبير البروتينات النشطة التي تحتوي على روابط ثنائي الكبريت.

سلالة SHuffle

سلالة SHuffle تعبر بشكل دائم عن إنزيم DsbC المماثل لرابطة الكبريت الثنائية في السيتوبلازم، مما يعزز تكوين الروابط الصحيحة للكبريت ثنائي الأكسدة في البروتينات المؤكسدة. كما تعمل كمساعد جزيئي لطي البروتينات، مساعدةً في تشكيل التشكل الصحيح.

سلالة Rosetta

تسهم سلالة Rosetta في تعويض البكتيريا E. coli بـ tRNA المتناظرة مع الكودونات النادرة بهدف تحسين مستوى التعبير الجيني للجينات الخارجية، خاصة الجينات اليوكنوية، في الأنظمة البروكاريotaية. مشتقة من BL21 وتحمل بلاسميد pRARE المقاوم لكلورامفينيكول، حيث تقوم بتعويض ست tRNA المتناظرة مع الكودونات النادرة (AUA، AGG، AGA، CUA، CCC، و GGA) التي كانت غائبة أصلاً في E. coli، مما يقدم بيئة "أكثر شمولية" لتعبير البروتينات.

خاتمة

العوامل الرئيسية الثلاثة لنجاح إنتاج البروتينات المركبة هي المضيف، الناقل، وظروف الت culturing. بناءً على فهم الخصائص الفيزيوكيميائية للبروتين المركب، المزايا الفريدة لكل سلالة، والحاجات الخاصة للتجربة، يجب اختيار المضيف الأنسب. بالإضافة إلى ذلك، يجب تحسين العوامل مثل المتجهات البلازميدية، درجة الحرارة، والمحفزات لتعزيز تعبير البروتين.

ياوهاي بايو-فارما تبحث أيضًا عن شركاء عالميين، سواء كانوا مؤسسات أو أفراد، وتقدم أكثر التعويضات تنافسية في الصناعة. إذا كان لديك أي أسئلة، لا تتردد في التواصل معنا: [email protected]